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醫學(xué)碩士開(kāi)題報告

時(shí)間:2024-06-07 08:43:30 報告 我要投稿

醫學(xué)碩士開(kāi)題報告

  在人們越來(lái)越注重自身素養的今天,報告使用的次數愈發(fā)增長(cháng),不同種類(lèi)的報告具有不同的用途。那么,報告到底怎么寫(xiě)才合適呢?下面是小編幫大家整理的醫學(xué)碩士開(kāi)題報告,供大家參考借鑒,希望可以幫助到有需要的朋友。

醫學(xué)碩士開(kāi)題報告

  一、立題依據(科學(xué)意義及國內外現狀分析及參考文獻)

  惡性黑色素瘤是一種高度惡性且侵襲性的癌之一,多發(fā)生于皮膚,早期發(fā)生血行轉移。對放、化療不敏感,在世界范圍內發(fā)病率增高,人們一直在期待著(zhù)可以征服惡性黑素瘤的新的療法的出現!

  最近大量的數據表明惡性腫瘤的發(fā)展與T—鈣粘蛋白的表達變化相關(guān)、T—鈣粘蛋白已在乳腺癌、前列腺癌、肝癌、肺癌[1—3] 、胃癌、胰腺癌、卵巢癌[4—9]等多種惡性腫瘤中被檢測到表達減少、最近的研究表明T/H—鈣粘蛋白在乳腺癌中的重新表達能抑制腫瘤細胞的生長(cháng),降低體外培養的腫瘤細胞的侵襲潛能[1]、T/H—鈣粘蛋白這個(gè)新型鈣粘蛋白分子在人類(lèi)許多癌細胞中表達都降低表明它或許在腫瘤細胞的侵襲和轉移[10]及維持正常細胞的表型中起重要作用[11]、T/H—鈣粘蛋白與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展有著(zhù)密切的聯(lián)系,也許它會(huì )為腫瘤的診斷和治療帶來(lái)新的契機、T—鈣粘蛋白是否對惡性黑色素瘤也有作用,目前還沒(méi)有相關(guān)研究的報道,所以本實(shí)驗將進(jìn)行相關(guān)方面的探討性研究!

  二、研究?jì)热菁邦A期成果(說(shuō)明具體研究?jì)热、?chuàng )新點(diǎn)及擬解決的關(guān)鍵問(wèn)題、預期成果及提供形式)

  研究?jì)热荩?/p>

  第一部分:正常表皮組織、痣細胞及黑色素瘤細胞中T—cadherin表達情況

  第二部分T—cadherin基因克隆和真核表達載體的構建

  第三部分:T—cadherin基因的真核表達及生物活性分析

  創(chuàng )新點(diǎn):首次將T—cadherin基因轉染黑素瘤細胞

  擬解決的關(guān)鍵問(wèn)題:通過(guò)RT—PCR反應擴增出T—cadherin的基因全長(cháng)。

  預期成果及提供形式:

  觀(guān)察T—鈣粘蛋白在正常皮膚組織細胞、痣細胞及黑色素瘤細胞中的表達情況!

  進(jìn)一步闡明T—鈣粘蛋白作用機制

  T—鈣粘蛋白基因轉染入黑色素瘤細胞后觀(guān)察對其增殖和轉移活性的抑制情況,探索臨床診斷和治療黑色素瘤及其它腫瘤的方法!

  三、研究方案(包括研究方法、技術(shù)路線(xiàn)、研究進(jìn)度安排)

  研究方法:

  第一部分:正常表皮組織、痣細胞及黑色素瘤細胞中T—cadherin表達情況

  免疫組織化學(xué)和免疫細胞化學(xué)

  1、材料:從正常人皮膚切取的痣組織,人黑色素瘤細胞株

  2、主要試劑和溶液

 。1)第一抗體:兔抗人T—cadherin抗體

 。2)第二抗體:生物素標記羊抗兔IgG

 。3)“三抗”:鏈親和霉素標記HRP

  3、設備

  4、方法

 。1)冷凍切片的免疫染色程序

 。2)活細胞的免疫染色程序

  5、熒光顯微鏡檢

  注意:為保證結果的可靠性應該同時(shí)設有對照

  陽(yáng)性對照(正常組織);

  陰性對照(PBS代替一抗)以證明抗體的特異性。

  第二部分T—cadherin基因克隆和真核表達載體的構建

  1、材料:

 。1)組織和細胞

 。2)菌株與質(zhì)粒

 。3)工具酶

 。4)試劑

 。5)儀器

  2、方法

 。1)引物的設計

 。2)總RNA的提。寒惲蚯杷犭摇印确鲁樘嵋徊椒

 。3)甲醛變性瓊脂糖凝膠電泳分析其質(zhì)量,觀(guān)察所提RNA有無(wú)明顯降解;

 。4)逆轉錄RT反應:為了證實(shí)RT反應的成功設管家基因GAPDH為內對照

 。5)PCR擴增:利用上下游引物,在DNA聚合酶下對目的片段進(jìn)行擴增,PCR過(guò)程設β—actin為內對照

 。6)PCR產(chǎn)物的回收、純化

 。7)PCR產(chǎn)物的克隆

 。8)DNA序列測定

 。9)真核重組表達質(zhì)粒的構建

 。10)陽(yáng)性重組質(zhì)粒的鑒定和篩選

 。11)質(zhì)粒的大量提取

 。12)轉染黑色素瘤細胞

  第三部分:T—鈣粘蛋白基因的真核表達及生物活性分析

  1、材料

  2、方法

 。1)轉染細胞的培養

 。2)Western印跡法檢測轉染后蛋白的表達

 。3)流式細胞周期分析

 。4)凋亡的檢測

  技術(shù)路線(xiàn)圖:

  研究進(jìn)度安排:

  20xx、9——20xx、7學(xué)習學(xué)位課程,查閱文獻,完成課題設計

  20xx、9——20xx、9基本完成實(shí)驗研究工作

  20xx、10——20xx、3完成實(shí)驗補遺工作并進(jìn)行統計分析,撰寫(xiě)論文

  20xx、4——20xx、6論文答辯

  四、經(jīng)費預算

  試劑費用:15000元組織及細胞:1000元

  文獻資料費:500元

  論文打印費:1000元

  答辯費:1500元

  總計:19000元

  五、課題可行性分析

  實(shí)驗在導師的指導下進(jìn)行,導師段昕所教授、主任醫師對黑色素瘤的診斷治療、檢測方法和研究進(jìn)展有深入的了解,對本課題的研究設計及實(shí)驗有重要的指導意義。

  已完成黑色素瘤及T—鈣粘蛋白研究最新進(jìn)展的文獻檢索和綜述報告工作。

  所有實(shí)驗均在承德醫學(xué)院附屬醫院皮膚病研究室和中心實(shí)驗室完成。實(shí)驗室的老師實(shí)驗技術(shù)熟練,在細胞培養、免疫組化及分子生物學(xué)等方面都可給予指導;實(shí)驗所需的科研儀器設備實(shí)驗室均具備。

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