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生物實(shí)驗報告

時(shí)間:2024-10-25 16:50:22 實(shí)驗報告 我要投稿

生物實(shí)驗報告【熱】

  隨著(zhù)個(gè)人的素質(zhì)不斷提高,需要使用報告的情況越來(lái)越多,不同的報告內容同樣也是不同的。一起來(lái)參考報告是怎么寫(xiě)的吧,以下是小編幫大家整理的生物實(shí)驗報告,歡迎大家借鑒與參考,希望對大家有所幫助。

生物實(shí)驗報告【熱】

  生物實(shí)驗報告1

  一、實(shí)驗目的:

  1、學(xué)會(huì )如何使用顯微鏡觀(guān)察細胞;

  2、了解細胞的結構;

  3、學(xué)會(huì )制作臨時(shí)裝片。

  二、實(shí)驗材料:(實(shí)驗材料可換)松針、動(dòng)物血液、動(dòng)物神經(jīng)細胞永久裝片

  三、實(shí)驗用具: 載玻片、蓋玻片、蒸餾水、滴管、鑷子、土豆、刀片、顯微鏡(物鏡5X、10X、40X)

  四、方法步驟:

  1、制作松針的臨時(shí)切片:

 。1)取干凈的載玻片一個(gè)平置于試驗臺上,用滴管在載玻片中央滴一滴蒸餾水。

 。2)將土豆切成條狀(截面約:0.5X0.5cm)取兩條,將一根松針夾在兩個(gè)土豆條之間,用刀片削成盡量薄的薄片,削時(shí),手腕不動(dòng),靠大臂帶動(dòng)小臂移動(dòng)刀片。切片數次。從中選取較薄的切片,置于載玻片的水滴上。

 。3)從一側輕輕蓋上蓋玻片,不要產(chǎn)生氣泡。用吸水紙輕輕吸去蓋玻片周?chē)乃,即完成臨時(shí)切片的制作。

  2、觀(guān)察切片:

 。1)取出顯微鏡,置于試驗臺上靠左的位置,打開(kāi)光源。

 。2) 將上步制作好的'切片置于顯微鏡的載物臺上,調整載物臺位置,使蓋玻片對準光源。

 。3)使用5X物鏡觀(guān)察切片,使松針切片在視野中心,換成10X物鏡,觀(guān)察松針葉面橫切結構。

 。4)換成40X物鏡觀(guān)察,注意細胞及細胞內物質(zhì)結構,畫(huà)圖。

  3、動(dòng)物血液臨時(shí)裝片的制作及觀(guān)察(除了不用切片,其他類(lèi)似)

  4、 動(dòng)物神經(jīng)細胞永久裝片的觀(guān)察。

  五、反思:

  1、松針的葉面結構是什么樣的?

  2、動(dòng)物細胞的結構是什么樣的?與植物細胞又什么不同?

  3、顯微鏡的物鏡倍數愈大,視野的亮度如何?物體的大小如何?

  4、如何調節焦距?

  5、如何才能使切片盡量的?切片的厚薄對顯微鏡下觀(guān)察的效果有什么影響。

  生物實(shí)驗報告2

  生物學(xué)是一門(mén)實(shí)驗科學(xué)。生物新課程倡導面向全體學(xué)生、提高生物科學(xué)素養和探究性學(xué)習的課程理念。其中探究學(xué)習是讓學(xué)生在主動(dòng)參與的過(guò)程中進(jìn)行學(xué)習,讓學(xué)生在探究問(wèn)題的活動(dòng)中獲取知識,了解科學(xué)家的工作方法和思維方法,學(xué)會(huì )科學(xué)研究所需要的各種技能,領(lǐng)悟科學(xué)觀(guān)念,培養科學(xué)精神。這種學(xué)習的方式的中心是針對問(wèn)題的探究活動(dòng),當學(xué)生面臨各種讓他們困惑的問(wèn)題時(shí),他就要想法尋找答案。

  在解決問(wèn)題時(shí),要對問(wèn)題進(jìn)行推理、分析,找出問(wèn)題解決的方向,然后通過(guò)觀(guān)察、實(shí)驗來(lái)收集事實(shí),通過(guò)對獲得的資料進(jìn)行歸納、比較、統計分析,形成對問(wèn)題的解釋。最后通過(guò)討論和交流進(jìn)一步澄清事實(shí),發(fā)現新的問(wèn)題,對問(wèn)題進(jìn)行更深入的研究。

  在此背景理念依據下,在教學(xué)中教學(xué)模式也將發(fā)生根本的改變,生物課將更多地開(kāi)展學(xué)生的試驗、討論、交流等活動(dòng)。引導學(xué)習教學(xué)模式就是在這種背景下構建的。具體的模式結構:?jiǎn)?wèn)題——閱讀、實(shí)驗——分析、推理、歸納、討論——結論。

  在運用這種模式的過(guò)程中我有下面幾點(diǎn)感觸:

  1、在教師的引導下學(xué)生可帶者問(wèn)題去閱讀、分析、討論資料,達到解決問(wèn)題的目的。比如:在學(xué)習〈空中飛行的動(dòng)物〉時(shí),教師可這樣引導學(xué)生;想一想,我們人要想在天空自由自在的飛翔必須先解決什么問(wèn)題?

  學(xué)生思考后說(shuō);一是,解決了動(dòng)力問(wèn)題。二是,解決了地心引力問(wèn)題。教師隨后提出問(wèn)題:鳥(niǎo)是如何解決這些問(wèn)題的?引導學(xué)生思考,讓學(xué)生帶著(zhù)問(wèn)題去看書(shū)、閱讀、討論、交流、的出結論。這樣既可提高學(xué)生的學(xué)習興趣,改變學(xué)習方式,又符合新課程的要求。

  2、合理開(kāi)發(fā)的.有效地利用一切可以利用的課程資源是實(shí)現課程目標,轉變學(xué)生學(xué)習方式的關(guān)鍵條件。知識、技能、經(jīng)驗、活動(dòng)方式方法等都是課程資源。在學(xué)習〈水中生活的動(dòng)物〉時(shí),對于生活在我這些地方的學(xué)生來(lái)說(shuō),對水中的動(dòng)物了解不多,而且上課時(shí)還不能做試驗,學(xué)生缺少感性的認識,這時(shí)教師就要引導學(xué)生開(kāi)發(fā)自己已有的課程資源。如:學(xué)習魚(yú)鰭的作用時(shí)引導學(xué)生想想:獨槳船和雙槳船他們的槳各起什么作用?在學(xué)習魚(yú)兒離開(kāi)水為什么會(huì )死?教師可引導學(xué)生回憶:頭發(fā)在水中水什么樣的?從水中出來(lái)時(shí)又是什么樣的?這樣就很容易理解知識,解決了問(wèn)題。

  3、信息化是當今世界經(jīng)濟和社會(huì )發(fā)展的大趨勢。新課程注重現代信息技術(shù)與生物新課程的整合。這樣可有效地應用數字化的優(yōu)勢達到學(xué)習目標。教師用編制成的演示文稿、多媒體課件來(lái)引導學(xué)生學(xué)習或作為學(xué)生自主學(xué)習的資源。

  在課程學(xué)習中,利用諸多的文字處理、圖形圖像處理、信息集成等工具,讓學(xué)生對課程學(xué)習內容進(jìn)行重組、創(chuàng )作,不僅使學(xué)生獲得知識,而且能夠幫助學(xué)生建構知識。但是,教師在制作多媒體課件時(shí),把每個(gè)知識點(diǎn)、每個(gè)環(huán)節設計的過(guò)于完美,在教師的引導下學(xué)生很簡(jiǎn)單的就可掌握知識,完成教學(xué)任務(wù)。但也存在著(zhù)弊端,這就是學(xué)生的自主學(xué)習不到位,在獲得知識的過(guò)程中缺少自主探究的過(guò)程。這個(gè)問(wèn)題就是我發(fā)現的問(wèn)題和努力改進(jìn)的方面。

  生物實(shí)驗報告3

  霉菌的培養與形態(tài)學(xué)觀(guān)察:實(shí)驗一真菌培養基的配制與滅菌

  實(shí)驗目的:

 。1)了解培養基的配置原理和方法,掌握分離培養微生物的有關(guān)準備工作。

 。2)掌握高壓滅菌方法及原理

  實(shí)驗原理:

 。1)培養基的制備原理:

  培養基是供微生物生長(cháng)、繁殖、代謝的混合養料。

  從營(yíng)養角度分析:

  營(yíng)養:碳源、氮源、能源、生長(cháng)素、水分和無(wú)機鹽等;?適宜的酸堿度(pH值)和一定緩沖能力;?一定的氧化還原電位;?合適的滲透壓。

  瓊脂是從石花菜等海藻中提取的膠體物質(zhì),是應用最廣的凝固劑。加瓊脂制成的培養基在98~100℃下融化,于45℃以下凝固,不容易被微生物污染。但多次反復融化,其凝固性降低。

 。2)濕熱滅菌原理-高壓蒸汽滅菌

  在密閉的蒸鍋內,其中的蒸汽不能外溢,壓力不斷上升,使水的沸點(diǎn)不斷提高,從而鍋內溫

  度也隨之增加。在0.1MPa的壓力下,鍋內溫度達121℃。在此蒸汽溫度下,可以很快殺死各種細菌及其高度耐熱的芽孢。

  實(shí)驗材料與方法

  配制培養基所需器材

  實(shí)驗設備:高壓蒸汽滅菌器。

  實(shí)驗器材:500ml三角燒瓶、藍蓋瓶、5ml刻度吸管、培養基、天平、砝碼、

  稱(chēng)量紙、藥勺、500ml、100ml量筒、牛皮紙、硫酸紙、橡皮筋、鐵絲筐、平皿、剪刀等。

  培養基等集中放講臺前高壓桶內,送到洗刷室統一高壓滅菌條件及注意事項

  高壓滅菌條件:121.3℃,15min。含糖培養基113℃,15min。

  倒平板電爐加熱滅菌好的培養基打開(kāi)平皿包裝倒平板(10塊)注意事項:空氣環(huán)境無(wú)菌(應在酒精燈火焰周?chē)鸁o(wú)菌區)。

  a.在酒精燈火焰處,傾斜打開(kāi)瓶口。

  b.瓶口要過(guò)火焰。

  c.左手掀開(kāi)平皿小口。

  d.傾注滿(mǎn)皿底再多一點(diǎn),約10ml(7cm直徑平皿)。

  e.推放一邊要輕緩,不能晃起瓊脂掛壁,易在培養過(guò)程中污染雜菌。

  f.完全凝固再翻轉平板放塑料筐內,4℃備用。

  分析與討論

 。1)如何證明培養基滅菌是否徹底?

  把滅菌后的培養基按滅菌鍋內的不同位置,每處抽取數管(瓶),標上記號,置25℃~30℃培養一周左右進(jìn)行檢查。如果培養基沒(méi)有什么變化,說(shuō)明滅菌效果良好;如果某一位置的培養基出現了雜菌菌落,可能是擺放的太緊,導致蒸汽不暢,或鍋的結構不合理等原因所致,應根據上述情況進(jìn)行改進(jìn);如果大部分或全部菌種瓶都出現雜菌,說(shuō)明滅菌溫度或滅菌時(shí)間不夠,應提高壓力或延長(cháng)滅菌時(shí)間。經(jīng)過(guò)幾次檢驗都證明能徹底滅菌后,以后按同樣條件滅菌的則不必進(jìn)行檢查。

  經(jīng)過(guò)幾次檢驗都證明能徹底滅菌后,以后按同樣條件滅菌的則不必進(jìn)行檢查。

 。2)為什么說(shuō)消毒與滅菌是微生物學(xué)和臨床醫學(xué)必不可少的基本知識?由于病原生物廣泛存在于自然界,可通過(guò)不同途徑和媒介進(jìn)入人體,引起感染或造成疾病流行。因此,殺滅或清除存在于體外傳播媒介上的病原生物,對于切斷傳播途徑、預防和控制其感染具有重要意義。自古以來(lái),人們就利用煮沸、火燒、日曬等方法殺滅或去除微生物,達到預防疾病的目的。實(shí)際上,除了在臨床醫療實(shí)踐中需要防止微生物的污染或感染外,在微生物學(xué)實(shí)驗室、食物保存、飲水凈化、藥品與生物制品生產(chǎn)等過(guò)程中都需要避免微生物的污染。

  實(shí)驗二霉菌的接種與培養

  實(shí)驗目的與要求:掌握霉菌與酵母菌的接種與培養方法。

  實(shí)驗原理:

  接種是微生物實(shí)驗及科學(xué)研究中一項基本操作技術(shù)。根據實(shí)驗目的和要求,

  選擇合適的接種工具與接種方法,接種工具有接種環(huán)、接種針、接種鏟、接種鉤、吸管、滴管、棉簽等。常用接種方法有:斜面接種,液體接種,穿刺接種,平板接種和固體接種。接種的關(guān)鍵是無(wú)菌操作。

  無(wú)菌操作的原則:在酒精燈火焰旁進(jìn)行,所有器皿均須嚴格消毒,培養基應事先做無(wú)菌試驗,

  接種工具使用前后須經(jīng)火焰燒灼滅菌,棉塞不能亂放,始終夾在手指中。在培養四大類(lèi)微生物時(shí)應注意選擇適宜的培養條件。多數細菌為專(zhuān)性需氧菌與兼性需氧菌,少數為厭氧菌。多數食品腐敗菌和工業(yè)用菌種,以及人和動(dòng)物病原菌的最適生長(cháng)溫度為37℃,并且在近中性(PH6.5~7.5)條件下生長(cháng)良好。多數放線(xiàn)菌為好氧菌,少數為厭氧菌,最適生長(cháng)溫度為28~30℃,多數適宜在偏堿性環(huán)境中生長(cháng)(PH7.5~8.5)。

  實(shí)驗材料與方法

 。1)實(shí)驗材料:實(shí)驗設備:溫箱。

  實(shí)驗器材:毛霉、曲霉、青霉、根霉、啤酒酵母、白假絲酵母、新生隱球酵母菌、細黃鏈霉菌、PDA平板、高鹽察氏平板、高氏合成I號平板、塑料筐、20%甘油水溶液、鑷子、接種鏟、無(wú)菌蓋玻片、無(wú)菌濾紙、無(wú)菌載玻片、石棉網(wǎng)、牛皮紙、硫酸紙、橡皮筋、鐵絲筐等。

 。2)實(shí)驗方法:平板接種:毛霉→PDA平板(點(diǎn)植法)

  啤酒酵母→PDA平板(五區分離劃線(xiàn)法)青霉、曲霉→PDA平板(連續劃線(xiàn)法)

  小室載玻片培養法:

  1、取滅菌后小室平皿。

  2、取無(wú)菌PDA瓊脂薄層平板,用鑷子夾住蓋玻片切割成0.5~1.0cm2的瓊脂塊,并將其移至培養小室中的載玻片上,制作過(guò)程注意無(wú)菌。

  3、用接種環(huán)取少量霉菌的孢子接種于培養基四周,用無(wú)菌鑷子

  將蓋玻片覆蓋在瓊脂塊上,并蓋上皿蓋,標記,置28~30℃培養3~5d

  糧食產(chǎn)品的平板接種:

  1.取糧食樣品20g,放入無(wú)菌燒杯,加無(wú)菌水洗滌,

  反復10次,棄去水后,將糧粒倒于平皿內備用2.鑷子取糧食種入PDA瓊脂內,每皿可接種5-10粒。

  放線(xiàn)菌的接種:取細黃鏈霉菌劃線(xiàn)法接種,在接種的劃線(xiàn)處,無(wú)

  菌操作斜插入蓋玻片數張。

  注意事項:

  1.空氣環(huán)境無(wú)菌(應在酒精燈火焰周?chē)鸁o(wú)菌區)

  2.在酒精燈火焰處,傾斜打開(kāi)瓶口。

  3.接種環(huán)使用前,直接在酒精燈上燒灼滅菌,把環(huán)和金屬絲燒紅即可。

  4.接種環(huán)使用后,先在火焰周?chē)循h(huán)上標本烤干,再燒灼滅菌,以免標本汽化,爆烈四濺,污染環(huán)境。5.金屬桿快速通過(guò)火焰2-3次,殺滅表面微生物

  分析與討論

  1、糧食中產(chǎn)毒真菌的種類(lèi)及產(chǎn)生毒素?

  青霉、毛霉、曲霉、根霉、酵母、白念、細黃鏈霉菌(放線(xiàn)菌)青霉素、絲生毛霉素、黃曲霉素、根霉素、白念菌素。細黃鏈菌素

  2、常用霉菌培養基有哪些?

  馬鈴薯蔗糖培養基

  豆芽汁葡萄糖(或蔗糖)瓊脂培養基察氏培養基

  3、霉菌的接種方法有何不同?為什么?

 。1)連續劃線(xiàn)法(青霉、曲霉)

  青霉與曲霉為局限性生長(cháng)的霉菌。應采用連續劃線(xiàn)接種法接種。(2)點(diǎn)植法(根霉、毛霉)

  根霉與毛霉生長(cháng)區域比較大,應采用點(diǎn)植法。(3)小室載玻片培養法(青霉、毛霉、根霉、曲霉)

  實(shí)驗三霉菌的制片與形態(tài)觀(guān)察

  實(shí)驗目的.:學(xué)習并掌握觀(guān)察霉菌形態(tài)的基本方法;

  了解四類(lèi)常見(jiàn)霉菌的基本形態(tài)特征。了解放線(xiàn)菌的基本形態(tài)特征。

  實(shí)驗原理:霉菌菌絲和孢子的寬度通常比細菌和放線(xiàn)菌粗得多(約為3-10μm),常是細

  菌菌體寬度的幾倍至幾十倍,因此,用低倍顯微鏡即可觀(guān)察。霉菌菌絲較粗大,細胞易收縮變形,且孢子容易飛散,所以制標本時(shí)常用乳酸石炭酸棉藍染色液,用此染液做霉菌制片的特點(diǎn)是細胞不變形,具有殺菌、防腐作用,不易干燥,能保持較長(cháng)時(shí)間,能防止孢子四處飛散,棉蘭具有一定的染色作用,染液的藍色能增大反差。

  實(shí)驗材料:

 。ㄒ唬┚N:在馬鈴薯瓊脂平板上培養3—4天的青霉(Penicilliumsp.)、曲霉(Aspergillussp.)、毛霉(Mucorsp.)、根霉;

 。ǘ┢鞑募坝镁撸鸿囎、載玻片、蓋玻片、顯微鏡。

  實(shí)驗方法:

 。ㄒ唬┲苯又破^(guān)察

  于潔凈載玻片上,用鑷子取霉菌菌落的邊緣處取小量帶有孢子的菌絲,然后小心地蓋上蓋玻

  片。置顯微鏡下先用低倍鏡觀(guān)察,必要時(shí)再換高倍鏡(二)小室培養觀(guān)察

  將載玻片直接放低倍鏡下觀(guān)察,再換高倍鏡觀(guān)察。

  觀(guān)察原則:

  毛霉:用低倍鏡觀(guān)察孢子囊梗、囊軸等。用高倍鏡觀(guān)察孢子囊孢子的形

  狀、大小。

  根霉:菌絲、孢子同毛霉,注意觀(guān)察有無(wú)假根。

  曲霉:在高倍鏡下觀(guān)察菌絲有無(wú)隔膜,分生孢子著(zhù)生位置,辨認分生孢

  子梗、頂囊、小梗和分生孢子。

  青霉:在高倍鏡下觀(guān)察菌絲有無(wú)隔膜,分生孢子梗、副枝、小梗和分生

  孢子的形狀等。實(shí)驗結果:

  分析與討論:

  青霉和曲霉的形態(tài)有哪些異同?

  青霉常分布在霉腐變質(zhì)的水果、蔬菜、糧食和皮革等物體上,菌體直立菌絲的頂端長(cháng)有掃帚狀的結構,結構的每一個(gè)分枝上,生有成串的孢子,成熟的孢子呈青綠色,進(jìn)行孢子生殖。

  曲霉廣泛分布在谷物、空氣和土壤中,曲霉直立菌絲的頂端膨大成球狀,球狀結構的表面放射狀地生有成串的孢子,孢子隨曲霉種類(lèi)的不同而呈黃色、橙色或黑色。

  從皮膚取材查真菌如何檢查?

  生物實(shí)驗報告4

  實(shí)驗: 練 習 使 用 顯 微 鏡

  目的要求:

  1、練習使用顯微鏡,學(xué)會(huì )規范的操作方法。

  2、能夠獨立操作顯微鏡。

  3、能夠將標本移動(dòng)到視野中央,并看到清晰的圖象。

  材料用具:

  顯微鏡、e字玻片、動(dòng)植物永久玻片、擦鏡紙、紗布

  方法和步驟:

  一、對照圖示認識顯微鏡,識別顯微鏡的結構及各部分的作用。

  二、練習使用顯微鏡

  1、取鏡和安放

  右手握住鏡臂,左手托住鏡座。 把顯微鏡放在實(shí)驗臺上,略偏左(顯微鏡放在距實(shí)驗臺邊緣7厘米左右處)。安裝好目鏡和物鏡。

  2、對光

  轉動(dòng)轉換器,使低倍物鏡對準通光孔(物鏡的前端與載物臺要保持2厘米的距離)。 把一個(gè)較大的光圈對準通光孔。左眼注視目鏡內(右眼睜開(kāi),便于畫(huà)圖)。轉動(dòng)反光鏡,使光線(xiàn)通過(guò)通光孔反射到鏡筒內。通過(guò)目鏡,可以看到白亮的視野。

  3、放置玻片標本

  4、觀(guān)察 (先低后高)

  把所要觀(guān)察的玻片標本放在載物臺上,用壓片夾壓住,標本要正對通光孔的中心。 轉動(dòng)粗準焦螺旋,使鏡筒緩緩下降,直到物鏡接近玻片標本為止(眼 睛看著(zhù)物鏡,以免物鏡碰到玻片標本)。 左眼向目鏡內看,同時(shí)反方向轉動(dòng)粗準焦螺旋,使鏡筒緩緩上升,直到看清物像為止。再略微轉動(dòng)細準焦螺旋,使看到的物像更加清晰。

  5、收放

  注意事項

  1、注意安全,不要損傷顯微鏡、目鏡和物鏡。

  2、材料對準通光孔,用壓片夾將玻片壓好。

  3、下降鏡筒時(shí),不要注視目鏡,一定要注視物鏡,以免損壞玻片標本和物鏡頭。

  4、取下玻片標本時(shí)要小心;

  5、實(shí)驗完畢,把顯微鏡的外表擦拭干凈。轉動(dòng)轉換器,把兩個(gè)物鏡偏到兩旁, 1

  并將鏡筒緩緩下降到最低處。最后把顯微鏡放進(jìn)鏡箱里,送回原處。 思考回答:

  1、在進(jìn)行低倍鏡觀(guān)察時(shí),使鏡筒下降至接近玻片的.過(guò)程中,眼睛應注視什么地方?為什么?

  2、光線(xiàn)較暗時(shí),應選用反光鏡的平面還是凹面?

  3、怎樣計算出視眼中的圖像的放大倍數?

  4、若視眼中“e”位于左上方,怎樣操作才能將其移到視眼中央?

  生物實(shí)驗報告5

  實(shí)驗生物組織中還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的鑒定

  一、實(shí)驗目的

  初步掌握鑒定生物組織中還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的基本方法。

  二、實(shí)驗原理

  1.還原糖的鑒定原理生物組織中普遍存在的還原糖種類(lèi)較多,常見(jiàn)的有葡萄糖、果糖、麥芽糖。它們的'分子內都含有還原性基團(游離醛基或游離酮基),因此叫做還原糖。蔗糖的分子內沒(méi)有游離的半縮醛羥基,因此叫做非還原性糖,不具有還原性。本實(shí)驗中,用斐林試劑只能檢驗生物組織中還原糖存在與否,而不能鑒定非還原性糖。

  斐林試劑由質(zhì)量濃度為0.1g/mL的氫氧化鈉溶液和質(zhì)量濃度為0.05g/mL的硫酸銅溶液配制而成,二者混合后,立即生成淡藍色的Cu(OH)2沉淀。Cu(OH)2與加入的葡萄糖在加熱的條件下,能夠生成磚紅色的Cu2O沉淀,而葡萄糖本身則氧化成葡萄糖酸。其反應式如下:

  CH2OH—(CHOH)4—CHO+2Cu(OH)2→CH2OH—(CHOH)4—COOH+Cu2O↓+2H2O

  用斐林試劑鑒定還原糖時(shí),溶液的顏色變化過(guò)程為:淺藍色棕色磚紅色(沉淀)。

  2.蛋白質(zhì)的鑒定原理鑒定生物組織中是否含有蛋白質(zhì)時(shí),常用雙縮脲法,使用的是雙縮脲試劑。雙縮脲試劑的成分是質(zhì)量濃度為0.1g/mL的氫氧化鈉溶液(A)和質(zhì)量濃度為0.01g/mL(B)的硫酸銅溶液。在堿性溶液(NaOH)中,雙縮脲(H2NOC—NH—CONH2)能與Cu2+作用,形成紫色或紫紅色的絡(luò )合物,這個(gè)反應叫做雙縮脲反應。由于蛋白質(zhì)分子中含有很多與雙縮脲結構相似的肽鍵,因此,蛋白質(zhì)可與雙縮脲試劑發(fā)生顏色反應。

  3.脂肪的鑒定原理脂肪可以被蘇丹Ⅲ染成橘黃色,被蘇丹Ⅳ染成紅色

  三、實(shí)驗過(guò)程(見(jiàn)書(shū)P18)

  四、實(shí)驗用品(見(jiàn)書(shū)P18)

  五、注意

  1.關(guān)于鑒定還原糖的實(shí)驗,在加熱試管中的溶液時(shí),應該用試管夾夾住試管上部,并放入盛開(kāi)水的大燒杯中加熱。注意試管底部不要接觸燒杯底部,同時(shí)試管口不要朝向實(shí)驗者,以免試管內溶液沸騰時(shí)沖出試管,造成燙傷。如果試管內溶液過(guò)于沸騰,可以上提試管夾,使試管底部離開(kāi)大燒杯中的開(kāi)水。

  2.斐林試劑的甲液和乙液混合均勻后方可使用,切勿將甲液和乙液分別加入組織樣液中。

  3.蛋白質(zhì)的鑒定中先加雙縮脲A,再加雙縮脲B

  六、討論

  鑒定生物組織中還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的根據是什么?

  生物實(shí)驗報告6

  一、實(shí)驗目的

  1. 學(xué)會(huì )提取和分離葉綠體中色素的方法。

  2. 比較、觀(guān)察葉綠體中四種色素:理解它們的特點(diǎn)及與光合作用的關(guān)系

  二、實(shí)驗原理

  光合色素主要存在于高等植物葉綠體的基粒片層上,而葉綠體中的色素能溶于有機溶劑

  中。故要提取色素,要破壞細胞結構,破壞葉綠體膜,使基粒片層結構直接與有機溶劑接

  觸,使色素溶解在有機溶劑中。

  葉綠體中的色素有四種,不同色素在層析液(脂溶性強的有機溶劑)中的溶解度不同,

  因而隨層析液的擴散速度也不同。

  三、材料用具

  取新鮮的綠色葉片、定性濾紙、燒杯、研缽、漏斗、紗布、剪刀、小試管、培養皿、毛細吸管、量筒、有機溶劑、層析液(20份石油醚、2份丙酮、1份苯混合)、二氧化硅、碳酸鈣。

  四、實(shí)驗過(guò)程(見(jiàn)書(shū)P54)

  1.提取色素:

  2.制備濾紙條:

  3.色素分離,紙層析法。(不要讓濾液細線(xiàn)觸及層析液)

  4.觀(guān)察:

  層析后,取出濾紙,在通風(fēng)處吹干。觀(guān)察濾紙條上出現色素帶的`數目、顏色、位置和寬窄。結果是:4條色素帶從上而下依次是:胡蘿卜素(橙黃色)、葉黃素(黃色)、葉綠素a(藍綠色)、葉綠素b(黃綠色)。

  五、討論

  1.濾紙條上的濾液細線(xiàn)為什么不能接觸到層析液?

  2.提取和分離葉綠體中色素的關(guān)鍵是什么?

  生物實(shí)驗報告7

  一、實(shí)驗目的

  1. 初步學(xué)會(huì )探索酶催化特定化學(xué)反應的方法。

  2. 探索淀粉酶是否只能催化特定的.化學(xué)反應。

  二、實(shí)驗原理

  淀粉和蔗糖都是非還原糖,它們在酶的催化作用下都能水解成還原糖,還原糖能夠與

  斐林試劑發(fā)生氧化還原反應,生成磚紅色的氧化亞銅沉淀。

  用淀粉酶分別催化淀粉溶液和蔗糖溶液,再用斐林試劑鑒定溶液中有無(wú)還原糖,就可

  以看出淀粉酶是否能催化這兩種化學(xué)反應。

  三、材料用具

  滴管、試管、火柴、試管架、溫度計、三腳架、石棉網(wǎng)、酒精燈、燒杯、質(zhì)量分數為2%的

  新鮮淀粉酶溶液、質(zhì)量分數為3%的可溶性淀粉溶液、質(zhì)量分數為3%的蔗糖溶液、斐林試劑

  四、實(shí)驗過(guò)程(見(jiàn)書(shū)P47)

  五、討論

  1.制備的可溶性淀粉溶液,必須完全冷卻后才能使用。為什么?

 。玻畠芍г嚬鼙貢r(shí),為什么要控制在60 ℃左右(低于50 ℃或高于75 ℃)?

  3.如果2號試管也產(chǎn)生了磚紅色沉淀,可能是由哪些原因造成的?

  生物實(shí)驗報告8

  【探究?jì)热荨?/strong>

  探究種子萌發(fā)的環(huán)境條件

  【探究目的】

 。、了解種子萌發(fā)需要的環(huán)境條件。

 。、學(xué)會(huì )進(jìn)行探究實(shí)驗的一般方法。

  【探究器材】

  種子100粒、5個(gè)能蓋緊的罐頭瓶、小勺一個(gè)、餐巾紙10張、標簽紙5張

  【探究過(guò)程】

  提出問(wèn)題:光的強弱會(huì )對種子萌發(fā)產(chǎn)生影響嗎?水的多少會(huì )對種子的萌發(fā)產(chǎn)生影響嗎?溫度的高低會(huì )對種子萌發(fā)產(chǎn)生影響嗎?空氣的流通會(huì )對種子萌發(fā)產(chǎn)生影響嗎?

  做出假設:光的強弱、水的多少、溫度的高低都會(huì )對種子的萌發(fā)產(chǎn)生一定的影響。

  制定計劃:準備100顆綠豆種子,5個(gè)有蓋的'瓶子,10張紙巾,5張便利貼。1號瓶的水只能濕透紙巾,并不能淹沒(méi)種子,放在空氣流通,有陽(yáng)光的地方;2號瓶的水不但能濕透紙巾,而且能把種子淹沒(méi),放在空氣流通,有陽(yáng)光的地方;3號瓶的水只能濕透紙巾,并不能淹沒(méi)種子,用蓋子把瓶子蓋上,使瓶子空氣不能流通;4號瓶的水只能濕透紙巾,并不能淹沒(méi)種子,放在冰箱里,盡量使瓶子里的水不結冰;5號瓶不放水,放在空氣流通,有陽(yáng)光的地方。

  實(shí)施計劃:每天都進(jìn)行實(shí)驗并觀(guān)察5個(gè)瓶子有什么變化,再把每天的變化都紀錄下來(lái)。

  分析結果:1號瓶大部分能發(fā)芽;2號瓶的種子皮破了,但不能發(fā)芽;3號瓶只有少許發(fā)了芽;4號瓶和5號瓶沒(méi)有發(fā)芽

  得出結論:想要種子發(fā)芽,一定要有適宜的光度;需要適量的水分,溫度也要控制好,空氣的流通也有一定的影響,但影響沒(méi)有光度、水分和溫度大,相對來(lái)說(shuō),空氣流通的影響較小。

  這個(gè)實(shí)驗很簡(jiǎn)單,我們在做實(shí)驗要分以上幾步完成,就會(huì )很容易的完成實(shí)驗。

  【交流與評估】

  1、根據你的問(wèn)題和假設,應當將種子分成幾組?XX每組應有多少粒種子?XX每組只有一粒種子可以嗎?

  2、對照組應提供的溫度、水分、空氣等條件應該如何?

  3、每個(gè)實(shí)驗組的處理,除了所研究的條件外,其他環(huán)境條件是否應與對照組相同?

  生物實(shí)驗報告9

  實(shí)驗一:練習使用顯微鏡

  目的要求:

  1.練習使用顯微鏡,學(xué)會(huì )規范的操作方法。

  2.能夠獨立操作顯微鏡。

  3.能夠將標本移動(dòng)到視野中央,并看到清晰的圖象。

  材料用具:顯微鏡,寫(xiě)有“上”字的玻片,動(dòng)、植物玻片標本,擦鏡紙,紗布。

  方法步驟

  1.右手握住鏡臂,左手托住鏡座。

  2.把顯微鏡放在實(shí)驗臺距邊緣7厘米左右處,略偏左。安裝好目鏡和物鏡。

  3.動(dòng)轉換器,使低倍物鏡對準通光孔。

  4.把一個(gè)較大的光圈對準通光孔。一只眼注視目鏡內,另一只眼睜開(kāi)。轉動(dòng)反光鏡,使光線(xiàn)通過(guò)通光孔反射到鏡筒內。通過(guò)目鏡可以看到白亮的圓形視野。

  5.把所要觀(guān)察的玻片標本放在載物臺上,用壓片夾壓住,標本要正對通光孔的中心。

  6.轉動(dòng)粗準焦螺旋,使鏡筒緩緩下降,直到物鏡接近玻片標本為止此時(shí)眼睛一定要看著(zhù)物鏡)。

  7.一只眼向目鏡內看,同時(shí)逆時(shí)針?lè )较蜣D動(dòng)粗準焦螺旋,使鏡筒緩緩上升直到看清物象為止。再略微轉動(dòng)細準焦螺旋,使看到的物象更加清晰。

  8.練習將所觀(guān)察的標本移到視野中央,先移動(dòng)一下標本,物象朝相反的方向移動(dòng)。說(shuō)明了在目鏡中看到的像是真實(shí)的像的倒像。

  注意事項

  實(shí)驗完畢,把顯微鏡的外表擦拭干凈。如需擦拭目鏡和物鏡,請用擦鏡紙。轉動(dòng)轉換器,把兩個(gè)物鏡偏到兩旁,并將鏡筒緩緩下降到最低處。最后把顯微鏡放進(jìn)鏡箱里,送回原處。

  討 論

  1.顯微鏡的使用步驟有哪些?

  答:1、取鏡和安放2、對光3、觀(guān)察(放片、調焦) 4、清潔與收鏡

  2.使用顯微鏡觀(guān)察時(shí),為什么在下降鏡筒時(shí)眼睛要注視物鏡?

  答:物鏡把載玻片壓碎,也容易劃傷物鏡。

  3.在顯微鏡下能看清寫(xiě)在不透明紙上的“上”字嗎?

  答:看不到,不透明的紙會(huì )阻擋光線(xiàn)從物鏡進(jìn)入光筒再從目鏡射出,所以可能什么也看不見(jiàn)。

  實(shí)驗時(shí)間:20xx.9.15

  實(shí)驗二:觀(guān)察植物細胞

  實(shí)驗目的:

  1、制作植物細胞的臨時(shí)裝片,學(xué)習制作臨時(shí)裝片的基本辦法.

  2、認識植物細胞等基本結構. 3、練習畫(huà)細胞結構圖.

  實(shí)驗準備:

  分組實(shí)驗器材:顯微鏡、洋蔥、小刀、清水、滴管、吸水紙、載玻片、蓋玻片、鑷子、放大鏡等。

  實(shí)驗過(guò)程:

  一、制作洋蔥表皮玻片標本

  1、用潔凈地紗布把載玻片擦拭干凈。

  2、把載玻片放在實(shí)驗臺上,用滴管在載玻片的中央滴一滴清水。

  制作臨時(shí)裝片

  3、用鑷子從洋蔥鱗片葉內側撕取一小塊透明在膜——內表皮。把撕下的內表皮浸入載玻片的水滴中,用鑷子把它展平。

  4、用鑷子夾起蓋玻片,是它的一邊先解除4載玻片上的水滴,然后緩緩地放下,蓋在要觀(guān)察的材料上,這樣才能避免蓋玻片下面出現氣泡而影響觀(guān)察。

  染色

  5、把一滴稀碘液滴在蓋玻片的一側。

  6、用吸水紙從蓋玻片的另一側吸引,使染液浸潤標本的全部。

  三、觀(guān)察洋蔥表皮細胞

  利用顯微鏡觀(guān)察洋蔥表皮細胞,先用低倍鏡下觀(guān)察,再在高倍鏡下觀(guān)察。

  四、洋蔥鱗片葉表皮細胞圖。

  五、實(shí)驗結束。

  回收實(shí)驗器材,整理實(shí)驗桌。

  實(shí)驗時(shí)間: 20xx.9.22

  實(shí)驗三:觀(guān)察人體口腔上皮細胞

  目的要求:

  1. 制作和觀(guān)察人體口腔上皮細胞的臨時(shí)裝片

  2. 認識人體口腔上皮細胞的結構

  3. 熟練畫(huà)細胞結構圖

  材料用具:

  顯微鏡、吸水紙、載玻片、蓋玻片、生理鹽水、碘液、鑷子、紗布、漱口杯、牙簽 方法步驟

  (一) 制作人口腔上皮細胞的臨時(shí)裝片

  1. 用紗布擦凈載玻片、蓋玻片(很薄,應輕擦)

  2. 在載玻片中央滴一滴生理鹽水(0.9%),說(shuō)明:為什么用0.9%的生理鹽水,觀(guān)

  察洋蔥表皮裝片用清水,都是為了讓細胞所處的環(huán)境和它們所生活的環(huán)境相同,

  不至于脹破或變形,使細胞保持原狀。

  3. 漱凈口。目的':將口腔的飯粒清除,以保證所取的細胞純度。

  4. 用牙簽在口腔內壁輕劃幾下,將上面附有碎屑涂抹在生理鹽水中,盡量涂均勻。

  5. 蓋蓋玻片。用鑷子夾起蓋玻片,使它的一側先接觸載玻片的水滴,然后慢慢放

  平(注意:避免產(chǎn)生氣泡)。

  6. 染色。①在蓋玻片一側滴加稀碘液,②用吸水紙在蓋玻片另一側吸引,使染液

  浸潤標本的全部。

  (二) 用顯微鏡觀(guān)察。

  使用顯微鏡①安放②對光③放置玻片標本,調節焦距,用眼觀(guān)察,在視野中會(huì )看到被染成桔黃色的上皮細胞.

 。ㄈ├L圖:

  人體口腔上皮細胞模式圖

 。ㄋ模┱恚呵鍧嵅F,廢物放在指定位置。

  歸納討論:人的口腔上皮細胞有哪些基本結構,植物細胞和動(dòng)物細胞相同和不同之處。 答:人的口腔上皮細胞的基本結構有細胞膜、細胞質(zhì)和細胞核;植物細胞與動(dòng)物細胞相比,細胞壁、葉綠體和液泡是植物細胞特有的。

  實(shí)驗時(shí)間: 20xx.9.27

  實(shí)驗四:觀(guān)察人體的基本組織

  目的要求:

  1.觀(guān)察人體基本組織的永久切片,認識人體的四種基本組織;

  2.描述同一種組織中細胞的共同特點(diǎn);

  3.描述不同組織中細胞形態(tài)上的不同之處;

  4.根據觀(guān)察,概述組織的共同特點(diǎn),形成組織的概念。

  材料器具:

  顯微鏡;扁平上皮、立方上皮、柱狀上皮等上皮組織玻片;橫紋肌、骨骼肌、心肌等肌肉組織玻片;骨、軟骨、血液、韌帶、肌腱、脂肪等結締組織玻片;神經(jīng)組織的玻片。

  方法步驟:

  1.根據教師提供的玻片,逐個(gè)在顯微鏡低倍鏡下認真觀(guān)察,注意細胞的形態(tài)特征和細胞間的聯(lián)系特點(diǎn)。

  2.根據觀(guān)察,同組間的同學(xué)互相討論,認真填寫(xiě)下表。

  主要分布位組織類(lèi)型 主要特征 功能 舉例 置

  皮膚,消化 皮膚,小腸腺上皮組織 排列緊密形成表面 保護,分泌 道 上皮

  四肢,軀 骨骼肌,平滑肌肉組織 呈長(cháng)條狀緊密排列 干,內臟器 收縮,舒張 肌 官

  支持,連接, 軟骨,軟組結締組織 細胞之間間隙較大 全身各處 保護,營(yíng)養 織,血液

  產(chǎn)生傳導興神經(jīng)組織 形狀獨特呈發(fā)散狀 神經(jīng)系統 神經(jīng)纖維 奮

  實(shí)驗時(shí)間:20xx.10.26

  實(shí)驗五:觀(guān)察葉片結構

  目的要求:

  1,練習徒手切片.

  2認識葉片的結構.

  3畫(huà)葉片的表皮細胞和保衛細胞圖.

  材料用具:

  新鮮葉片,顯微鏡,雙面刀片,鑷子,載玻片,蓋玻片,葉片的永久切片,盛有清水的培養皿,滴管,吸水紙,碘液,紗布,毛筆,小木板.

  方法步驟:

  一,練習徒手切片,制作葉片橫切片的臨時(shí)切片

  1,把新鮮的葉片平放在小木板上.

  2,右手捏緊并排的兩片刀片,沿著(zhù)圖中虛線(xiàn)的方向,迅速切割.

  3,刀片的夾縫中春游切下的薄片.要多切幾次(每且一次,刀片要咱蘸一下稅)。把切下的薄片放入水中。

  4,用毛筆蘸出最薄的一片,制成臨時(shí)切片。

  二,觀(guān)察葉片的結構

  1用顯微鏡先觀(guān)察葉片橫切面的臨時(shí)切片,再觀(guān)察葉片的永久橫切片。

  2在顯微鏡下分清業(yè)的表皮,葉肉和葉脈。

  三,觀(guān)察葉片的下表皮

  1用鑷子撕下一小塊葉片(如蠶豆葉片的下表皮,制成臨時(shí)裝片。

  2 用顯微鏡進(jìn)行觀(guān)察,看一看葉片下表皮的細胞是什么樣子的,下表皮上有沒(méi)有氣孔?下表皮氣孔多于上表皮。

  四,實(shí)驗結果。

  討論:保衛細胞和它周?chē)募毎诮Y構上有什么不同?保衛細胞的這種結構特點(diǎn)對蒸騰作用有什么意義?

  答:當水分充足時(shí),保衛細胞膨脹張開(kāi),則氣孔張開(kāi),這時(shí),蒸騰作用很強;當水分不充足時(shí),保衛細胞收縮關(guān)閉,則氣孔關(guān)閉,這時(shí),蒸騰作用變弱。保衛細胞能夠控制氣孔開(kāi)關(guān),所以也就能起到促進(jìn)或減緩蒸騰作用的意義。

  實(shí)驗時(shí)間:20xx.12.5

  生物實(shí)驗報告10

  質(zhì)粒DNA的提取、純化及檢測

  姓名:XXX學(xué)號:2011001400XX年級:20xx級生物基地班 實(shí)驗日期:20xx年9月16日—30日組別:6組 同組者:XX

  一、【實(shí)驗目的】

  1、掌握堿變性提取法提取大腸桿菌中質(zhì)粒DNA的原理和方法。

  2、學(xué)習并掌握凝膠電泳進(jìn)行DNA的分離純化的實(shí)驗原理。

  3、學(xué)習并掌握凝膠的制備及電泳方法。

  4、學(xué)習并掌握凝膠中DNA的分離純化方法。

  二、【實(shí)驗原理】

  1、質(zhì)粒DNA的制備方法

  質(zhì)粒(Plasmid)是獨立存在于染色體外、能自主復制并能穩定遺傳的一種環(huán)狀雙鏈DNA分子,分布于細菌、放線(xiàn)菌、真菌以及一些動(dòng)植物細胞中,但在細菌細胞中含量最多。細菌質(zhì)粒大小介于1~200Kb之間,是應用最多的質(zhì)粒類(lèi)群,在細菌細胞內它們利用宿主細胞的復制機構合成質(zhì)粒自身的DNA。

  質(zhì)粒DNA的制備包括3個(gè)步驟:①培養細菌,使質(zhì)粒DNA大量擴增;②收集和裂解細菌;③分離和純化質(zhì)粒DNA。主要方法包括:堿裂解法:0。2molNaOH+1%SDS;煮沸裂解法:沸水煮沸40秒;SDS裂解法:10%SDS,一般用于質(zhì)粒大量提取。在實(shí)際操作中可以根據宿主菌株類(lèi)型、質(zhì)粒分子大小、堿基組成和結構等特點(diǎn)以及質(zhì)粒DNA的用途進(jìn)行選擇。本實(shí)驗選擇堿裂解法提取質(zhì)粒DNA。

  2、質(zhì)粒DNA的提取——堿變性提取法

  在細菌細胞中,染色體DNA和質(zhì)粒DNA均被釋放出來(lái),但是兩者變性與復性所依賴(lài)的溶pH值不同。在pH值高達12。0的堿性溶液中,染色體DNA的氫鍵斷裂,雙螺旋結構解開(kāi)而變性;共價(jià)閉合環(huán)狀質(zhì)粒DNA的大部分氫鍵斷裂,但兩條互補鏈不完全分離。因為它們在拓撲學(xué)上是相互纏繞的。當用pH值4。6的KAc(NaAc)高鹽溶液調節堿性溶液至中性時(shí),變性的質(zhì)粒DNA可恢復原來(lái)的共價(jià)閉合環(huán)狀超螺旋結構而溶解于溶液中;但染色體DNA不能復性,而是與不穩定的大分子RNA、蛋白質(zhì)—SDS復合物等一起形成纏連的、可見(jiàn)的白色絮狀沉淀。這種沉淀通過(guò)離心,與復性的溶于溶液的質(zhì)粒DNA分離。溶于上清液的質(zhì)粒DNA,可用無(wú)水乙醇和鹽溶液,使之凝聚而形成沉淀。由于DNA和RNA性質(zhì)類(lèi)似,乙醇沉淀

  DNA的同時(shí),也伴隨著(zhù)RNA沉淀,可利用RNaseA將RNA降解。質(zhì)粒DNA溶液中的RNaseA以及一些可溶性蛋白,可通過(guò)酚/氯仿抽提除去,最后獲得純度較高的質(zhì)粒DNA。

  3、凝膠電泳進(jìn)行DNA分離純化

  電泳(electrophoresis)是帶電物質(zhì)在電場(chǎng)中向著(zhù)與其電荷相反的電極方向移動(dòng)的現象。各種生物大分子在一定pH條件下,可以解離成帶電荷的離子,在電場(chǎng)中會(huì )向相反的電極移動(dòng)。凝膠是支持電泳介質(zhì),它具有分子篩效應。含有電解液的凝膠在電場(chǎng)中,其中的電離子會(huì )發(fā)生移動(dòng),移動(dòng)的速度可因電離子的大小形態(tài)及電荷量的不同而有差異。利用移動(dòng)速度差異,就可以區別各種大小不同的`分子。因而,凝膠電泳可用于分離、鑒定和純化DNA的片段,是分子生物學(xué)的核心技術(shù)之一。

  凝膠電泳技術(shù)操作簡(jiǎn)單而迅速,分辨率高,分辨范圍廣。此外,凝膠中DNA的位置可以用低濃度熒光插入染料如溴化乙錠(ethidium bromide,EB)或SYBR Gold染色直接觀(guān)察到,甚至含量少至20pg的雙鏈DNA在紫外激發(fā)下也能直接檢測到。需要的話(huà),這些分離的DNA條帶可以從凝膠中回收,用于各種各樣目的的實(shí)驗。

  分子生物學(xué)中,常用的兩種凝膠為瓊脂糖(agarose)和聚丙烯酰胺凝膠。這兩種凝膠能灌制成各種形狀、大小和孔徑,也能以許多不同的構型和方位進(jìn)行電泳。聚丙烯酰胺凝膠分辨率高,使用于較小分子核酸(5—500bp)的分離和蛋白質(zhì)電泳。它的分辨率非常高,長(cháng)度上相差1bp或質(zhì)量上相差0。1%的DNA都可以彼此分離,這也是采用聚丙烯酰胺凝膠電泳進(jìn)行DNA序列分析的分子基礎。雖然它能很快地進(jìn)行電泳,并能容納較大的DNA上樣量,但是與瓊脂糖凝膠相比,在制備和操作上繁瑣。瓊脂糖是從海藻中提取的長(cháng)鏈狀多聚物,由β—D—吡喃半乳糖與3,6—脫水—L—吡喃半乳糖組成,相對分子質(zhì)量為104—105。瓊脂糖加熱至90℃左右,即可溶化形成清亮、透明的液體,澆在模版上冷卻后形成凝膠,其凝固點(diǎn)為40—45℃。瓊脂糖凝膠相對于聚丙烯酰胺凝膠分辨率低,但它的分離范圍更大(50至百萬(wàn)bp),小片段DNA(50—20000bp)最適合在恒定輕度和方向的電場(chǎng)中水平方向的瓊脂糖凝膠內電泳分離。瓊脂糖凝膠電泳易于操作,適用于核酸電泳,測定DNA的相對分子質(zhì)量,分離經(jīng)限制酶水解的DNA的片段,進(jìn)一步純化DNA等。

  瓊脂糖凝膠電泳是一種常用的方法。在溶液中,由于核酸有磷酸基而帶有負電荷,在電場(chǎng)中向正極移動(dòng)。DNA在瓊脂糖凝膠中的電泳遷移率主要取決于6個(gè)因素:樣品DNA分子的大小、DNA分子的構象、瓊脂糖濃度、電泳所用電場(chǎng)、緩沖液和溫度。

  三、【實(shí)驗材料】

  1、實(shí)驗儀器

  培養皿、接種環(huán)、三角瓶、酒精燈、恒溫振蕩培養箱、50ml離心管、1。5ml塑料離心管(Eppendorf管)、高速離心機、漩渦振蕩器、微量移液器、不同型號槍頭、天平、制膠槽、梳子、電泳儀、吸管、量筒、微波爐、滅菌鍋、恒溫水浴鍋、試劑瓶、衛生紙和記號筆、手套等。

  2、實(shí)驗試劑

  LB培養基,抗生素Ap(氨芐青霉素),溶液Ⅰ,溶液Ⅱ,溶液Ⅲ,RNaseA母液,TE緩沖液,飽和酚,氯仿/異戊醇混合液,酚/氯仿/異戊醇(PCI)混合液,預冷無(wú)水乙醇,TAE電泳緩沖液(10×),上樣緩沖液(6×),瓊脂糖,溴化乙錠(EB),DNA相對分子質(zhì)量標準物DNA Marker λ/Hind Ⅲ,5mol/L pH 5。2的醋酸鈉。

  四、【實(shí)驗步驟】

  1、準備實(shí)驗

  配制LB液體培養基,分裝到100ml的三角瓶中20ml,300ml的三角瓶中50ml,另配LB固體培養基;準備1000ul、200ul、10ul移液槍尖各一盒,1。5ml離心管若干于500ml三角瓶中,50ml離心管2個(gè) ,將上述物品包好連同配好的培養基一同滅菌。

  2、菌體培養

  在含有Ap的LB平板上挑取一環(huán)攜帶有質(zhì)粒pUC19的E。coli DH5單菌落,接種于20mlLB液體培養基中進(jìn)行37℃振蕩過(guò)夜培養,培養基中加Ap100ul

 。100ug/ml),質(zhì)粒pUC19具有Ap抗性基因,使得帶有pUC19的質(zhì)粒得以生長(cháng)。 過(guò)夜培養后菌體量大,雜質(zhì)較多,然后用移液槍吸取過(guò)夜培養物2ml轉接于50mlLB液體培養基中,培養基中加入Ap250ul,37℃振蕩培養4—6h至對數生長(cháng)期后期,生長(cháng)速率快,代謝旺盛,酶系活躍,雜質(zhì)少,適合提取質(zhì)粒。

  3、質(zhì)粒提取

 。1)稱(chēng)量空的50ml離心管的重量為14。331g,然后將三角瓶中的菌液倒至管中,不能倒滿(mǎn),液面距管口約1cm,7000rpm離心5分鐘后棄去上清液,收集菌體細胞。

 。2)向離心管中懸滴加入5ml冰預冷的溶液Ⅰ打散菌體洗滌,用漩渦振蕩器使之充分懸浮后用槍尖吹吸混勻,同步驟(1)離心,棄去上清,將離心管倒置于吸水紙上,使上清液全部流盡干燥,然后稱(chēng)重得14。437g,則菌體質(zhì)量為106mg。

 。3)洗滌后每100mg菌體應加入冰預冷的溶液Ⅰ1ml,106mg菌體按100mg菌體處理,加入溶液Ⅰ1ml,打散菌泥、吹吸混勻,冰浴5min。溶液Ⅰ中的葡萄糖使

  溶液密度增加,懸浮后的大腸桿菌不會(huì )快速沉積到管子的底部;維持滲透壓,防止細胞提前破裂,防止DNA受機械剪切力作用而降解。EDTA是Ca2+和Mg2+等二價(jià)金屬離子的螯合劑,可抑制DNase的活性,抑制微生物的生長(cháng)。Tris—Cl溶液提供適當的pH。

 。4) 按比例加入新配制的溶液Ⅱ2ml(與溶液Ⅰ對應),輕加輕搖,冰浴5min。溶液變清亮透明粘稠如蛋清狀。溶液Ⅱ中的NaOH使細胞膜發(fā)生了從bilayer(雙層膜)結構向micelle(微囊)結構的相變化導致細胞溶解。同時(shí),強堿性使染色體DNA、質(zhì)粒DNA和蛋白質(zhì)變性;SDS為下一步沉淀做鋪墊。

 。5)按比例加入冰預冷的溶液Ⅲ1。5ml(與溶液Ⅰ、Ⅱ對應),輕加輕搖,冰浴10min。溶液出現白色絮狀沉淀。沉淀為蛋白質(zhì)SDS復合物、細胞碎片和其他大分子成分。溶液Ⅲ中的HAc中和NaOH,因為長(cháng)時(shí)間的堿性條件會(huì )打斷基因組DNA,只要是50-100 kb大小的片斷,就不能再被PDS共沉淀。同時(shí)變性的質(zhì)粒DNA復性。反應形成的高鹽環(huán)境進(jìn)一步加速了沉淀。

 。6)12000rpm離心15min,白色沉淀聚集在離心管一側,用移液槍將上清液轉移到另一潔凈的離心管中。然后向上清液中加入1/10體積的3MNaAc混勻,加入2倍體積的冰無(wú)水乙醇,混勻,—20℃下沉降30分鐘。乙醇可以任意比和水相混溶,乙醇與核酸不會(huì )起任何化學(xué)反應,對DNA很安全,因此是理想的沉淀劑。 DNA溶液是DNA以水合狀態(tài)穩定存在,當加入乙醇時(shí),乙醇會(huì )奪去DNA周?chē)乃肿,使DNA失水而易于聚合。在pH為8左右的溶液中,DNA分子是帶負電荷的,加一定濃度的NaAc或NaCl,易于互相聚合而形成DNA鈉鹽沉淀。

 。7) 以12000rpm離心15min,小心倒去上清液,得到DNA沉淀。加入3ml70%冰乙醇,輕輕地覆蓋沉淀,不打散沉淀,洗滌一次。

 。8)以12000rpm離心5min,離心管底部DNA沉淀所在面應與收集沉淀面一致。去掉上清液,將離心管上沉淀部位做好標記,將離心管倒置于吸水紙上,干燥5min。粗提取的質(zhì)粒呈淺黃色,隨著(zhù)水分的減少質(zhì)粒變?yōu)闊o(wú)色。所以為了完全溶解質(zhì)粒,要在離心管上標記質(zhì)粒所在位置。

 。9)將DNA沉淀溶于1mlTE緩沖液中,移液槍吹吸助溶,然后將溶解液轉移到一個(gè)Eppendorf管中。TE是pH緩沖液,為DNA提供穩定的生理狀態(tài),呈弱堿性,有利于保護堿基對。同時(shí)含有EDTA是二價(jià)陽(yáng)離子的螯合劑,抑制DNA酶作用。

  4、質(zhì)粒純化

 。1)Eppendorf管中加入RNase A(純濃度>50ug/ml),37℃保溫0。5—1h

 。2)將上述的溶液平均分配到2個(gè)1。5ml的微量離心管中,每管0。5ml,分別加入與溶液等體積的(500ul)Tris飽和苯酚溶液,振蕩混勻,7000rpm,離心5min,上清液轉移到一潔凈的Eppendorf管中。苯酚是經(jīng)Tris飽和后的,顯黃色。苯

  酚加入后,溶液分層,苯酚向下,下層呈淺黃色,上層溶液無(wú)色,在中間產(chǎn)生大量白色沉淀,此為變性后的蛋白質(zhì)。

 。3)加入等體積的(500ul)苯酚/氯仿溶液(1:1),振蕩混勻, 7000rpm,離心5min,上清液轉移到到另一潔凈的Eppendorf管中。苯酚是強的蛋白變性劑,但是苯酚留在質(zhì)粒溶液中會(huì )影響DNA的酶切,它本身易被氧化,會(huì )損傷質(zhì)粒。氯仿也是蛋白變性劑,但是比酚弱,且能溶解質(zhì)粒中的脂類(lèi),溶解苯酚,去除溶液中的苯酚。異戊醇則可起消除抽提過(guò)程中出現的泡沫,有利于分層更明顯。此時(shí)溶液中已看不到明顯的白色沉淀,但仍有蛋白質(zhì)的存在。

 。4)加入等體積的氯仿溶液,振蕩混勻, 7000rpm,離心5min,上清液轉移到一潔凈的Eppendorf管中,得上清液400ul。

 。5)向上清液中加入1/10體積的NaAc混勻,再加入2倍體積的冰無(wú)水乙醇,混勻,—20℃下沉降30分鐘。

 。6)以12000rpm,離心15min,棄去上清液,得到DNA沉淀,為白色。

 。7)向DNA沉淀中加入70%冰乙醇200ul,不打散沉淀,洗滌。然后以12000rpm離心5min,離心管底部DNA沉淀所在面應與收集沉淀面一致。

 。8)去掉上清液,將離心管倒置于吸水紙上,室溫干燥。用50ulTE溶解于1管中。

  5、質(zhì)粒檢測

 。1)稱(chēng)取0。4g的瓊脂糖,置于一錐形瓶中,在三角瓶上標好液面位置,加入40ml的1×TAE電泳緩沖液,再加入5—10ml重蒸水,以補充在溶膠過(guò)程中損失的水分。然后置微波爐加熱至完全溶化,溶液透明。冷卻至50℃左右,倒入制板槽制板。

 。2)待膠凝固后,小心拔起梳子,使加樣孔端置陰極段放進(jìn)電泳槽內。在槽內加入1×TAE 電泳緩沖液,至液面覆蓋過(guò)膠面2—3cm。取1μl加電泳載樣液和3μl質(zhì)粒樣品于小紙片上,用移液槍混勻。

 。3)電泳1h,觀(guān)察溴酚蘭的帶(藍色)的移動(dòng)。

 。4) 把膠槽取出,小心滑出膠塊,放進(jìn)EB溶液中進(jìn)行染色,完全浸泡約5min。

 。5)凝膠成像儀觀(guān)察。

  五、【注意事項】

 。1)滴加溶液II時(shí),要逐滴加入,且要輕加輕搖溶液使之混勻,整體動(dòng)作要快,因為強堿在溶液中停留時(shí)間不能過(guò)長(cháng),否則會(huì )破壞質(zhì)粒DNA。

 。2)加入溶液III后,生成了大量的絮狀沉淀,溶液III中和強堿使質(zhì)粒復性,不可劇烈震蕩, 防止染色體DNA斷裂,應該上下顛倒離心管,使其混勻。

  生物實(shí)驗報告11

  實(shí)驗一練習使用顯微鏡

  目的要求

  1、練習使用顯微鏡,學(xué)會(huì )規范的操作方法。

  2、能夠獨立操作顯微鏡。

  3、能夠將標本移動(dòng)到視野中央,并看到清晰的圖象。材料用具:

  顯微鏡、e字玻片(寫(xiě)有上字的玻片)、動(dòng)植物永久玻片、擦鏡紙、紗布

  方法和步驟

  一、取鏡和安放

  1.右手握住鏡臂,左手托住鏡座。

  2.把顯微鏡放在實(shí)驗臺上,略偏左(顯微鏡放在距實(shí)驗臺邊緣7厘米左右處)。安裝好目鏡和物鏡。

  二、對光

  3.轉動(dòng)轉換器,使低倍物鏡對準通光孔(物鏡的前端與載物臺要保持2厘米的距離)。

  4.把一個(gè)較大的光圈對準通光孔。左眼注視目鏡內(右眼睜開(kāi),便于以后同時(shí)畫(huà)圖)。轉動(dòng)反光鏡,使光線(xiàn)通過(guò)通光孔反射到鏡筒內。通過(guò)目鏡,可以看到白亮的視野。

  三、觀(guān)察

  5.把所要觀(guān)察的玻片標本(也可以用印有“e”字的薄紙片制成)放在載物臺上,用壓片夾壓住,標本要正對通光孔的中心。

  6.轉動(dòng)粗準焦螺旋,使鏡筒緩緩下降,直到物鏡接近玻片標本為止(眼睛看著(zhù)物鏡,以免物鏡碰到玻片標本)。

  7.左眼向目鏡內看,同時(shí)反方向轉動(dòng)粗準焦螺旋,使鏡筒緩緩上升,直到看清物像為止。再略微轉動(dòng)細準焦螺旋,使看到的物像更加清晰。

  注意事項

  1、注意安全,不要損傷顯微鏡、目鏡和物鏡。

  2、材料對準通光孔,用壓片夾將玻片壓好。

  3、下降鏡筒時(shí),不要注視目鏡,一定要注視物鏡,以免損壞玻片標本和物鏡鏡頭。

  4、取下玻片標本時(shí)要小心;

  5、實(shí)驗完畢,把顯微鏡的外表擦拭干凈。轉動(dòng)轉換器,把兩個(gè)物鏡偏到兩旁,并將鏡筒緩緩下降到最低處。最后把顯微鏡放進(jìn)鏡箱里,送回原處。

  實(shí)驗二觀(guān)察人體的基本組織

  目的要求:

  1.觀(guān)察人體基本組織的永久切片,認識人體的四種基本組織;

  2.描述同一種組織中細胞的共同特點(diǎn);

  3.描述不同組織中細胞形態(tài)上的不同之處;

  4.根據觀(guān)察,概述組織的共同特點(diǎn),形成組織的概念。材料器具:

  顯微鏡;扁平上皮、立方上皮、柱狀上皮等上皮組織玻片;橫紋肌、骨骼肌、心肌等肌肉組織玻片;骨、軟骨、血液、韌帶、肌腱、脂肪等結締組織玻片;神經(jīng)組織的玻片。

  方法步驟:

  1.根據教師提供的玻片,逐個(gè)在顯微鏡低倍鏡下認真觀(guān)察,注意細胞的形態(tài)特征和細胞間的聯(lián)系特點(diǎn)。

  【思考】

  1.上皮組織一般都分布在人體的什么位置?想一想,上皮組織有什么主要的功能?

  2.神經(jīng)組織的主要功能是“接受刺激,產(chǎn)生和傳導興奮”,構成神經(jīng)組織的細胞結構上有什么特點(diǎn)與這種功能相適應?3.請試著(zhù)用自己的語(yǔ)言,給組織下定義。

  實(shí)驗三用顯微鏡觀(guān)察人血的永久涂片

  實(shí)驗方案

  一、取鏡和安放

  一手握鏡臂,一手托鏡座,將顯微鏡從鏡箱中取出并放在實(shí)驗臺上,略偏左。

  二、對光

  1、轉動(dòng)轉換器,使低倍物鏡正對通光孔。

  2、轉動(dòng)遮光器,選擇較大的光圈對準通光孔。

  3、一眼注視目鏡內,一眼睜開(kāi),同時(shí)把反光鏡轉向光源,通過(guò)目鏡看到白亮視野后并報告教師。

  三、觀(guān)察

  1、把涂片放在載物臺上,用壓片夾壓住,標本要正對通光孔的中心。

  2、從側面注視物鏡,轉動(dòng)粗準焦螺旋,使鏡筒緩慢下降接近涂片。

  3、一眼注視目鏡內,同時(shí)反方向轉動(dòng)粗準焦螺旋,使鏡筒緩緩上升,直至看到物像,再略微轉動(dòng)細準焦螺旋,直至物像清晰,報告老師。

  4、正確填寫(xiě)實(shí)驗報告。

  四、整理

  1、取下涂片并復位。

  2、用紗布擦拭顯微鏡外表。

  3、轉動(dòng)轉換器,讓兩物鏡偏到兩旁,并將鏡筒降至最低位置。

  4、將顯微鏡放回鏡箱。

  實(shí)驗四觀(guān)察小魚(yú)尾鰭內血液的流動(dòng)

  一、目的要求:

  1.觀(guān)察血液在血管內的流動(dòng)。

  2.嘗試分辨血管的種類(lèi)以及血液在不同血管內的流動(dòng)情況。

  二、材料用具:

  尾鰭色素少的小魚(yú)、顯微鏡、培養皿、滴管、棉絮。

  三、實(shí)驗步驟:

  1、檢查實(shí)驗材料用具

  2、仔細檢查實(shí)驗材料用具是否齊全

  3、取放、組裝、調試顯微鏡

  4、取放顯微鏡的步驟、方式是否正確;組裝、調試顯微鏡的方法是否科學(xué)。

  四、實(shí)驗操作與觀(guān)察

  1、用浸濕的棉絮將小魚(yú)頭部的鰓蓋和軀干部包裹起來(lái),露出口和尾部。

  2、將小魚(yú)平放在培養皿中,使尾鰭平貼在培養皿上,并在尾鰭上放載玻片。

  3、將培養皿放在載物臺上,用低倍顯微鏡觀(guān)察尾鰭血管內血液的流動(dòng)情況。

  4、找到管徑最小的血管,注意觀(guān)察血液在這種血管中的流動(dòng)情況。

  5、注意觀(guān)察管徑最小的血管是由什么血管分支而來(lái)的,它最終又匯入什么血管中。

  五、清潔、整理實(shí)驗用具

  1將顯微鏡復原,放回顯微鏡箱。

  2將培養皿、滴管等沖洗干凈并清潔實(shí)驗桌面。

  六、注意事項

  1、是否用浸濕的棉絮將小魚(yú)頭部的鰓蓋和軀干部包裹起來(lái)。

  2、是否露出小魚(yú)的口和尾部。

  3、小魚(yú)的尾鰭是否平貼在培養皿上。

  4、是否在小魚(yú)的尾鰭上放載玻片。

  5、是否用低倍顯微鏡觀(guān)察尾鰭血管內血液的流動(dòng)情況。

  6、是否找到管徑最小的血管。

  7、實(shí)驗后是否將小魚(yú)放回魚(yú)缸

  實(shí)驗五魚(yú)鰭在游泳中的作用

  引課:提起魚(yú),大家都不陌生,魚(yú)在水中能自由自在的游動(dòng),既能向前游動(dòng),又能上浮,下潛,還能轉彎以及停留在一定的水層。那么,魚(yú)在游泳中各種鰭起什么作用呢?今天,我們就來(lái)探究一下魚(yú)鰭在游泳中的作用。

  方法一:模型模擬法(當不能用直接實(shí)驗法做實(shí)驗時(shí),可以用模擬實(shí)驗代替實(shí)驗法,即用模型代替實(shí)驗對象進(jìn)行實(shí)驗,模擬實(shí)驗的缺點(diǎn)是:其研究結果易受模型的局限,得出的結論不一定完全可靠。一般來(lái)說(shuō)模型與實(shí)驗對象的相似程度越高,實(shí)驗的效果越好。)

  方法二:剪除魚(yú)鰭法(太殘忍)

  方法三:捆扎魚(yú)鰭法注意事項:(對實(shí)驗材料用具的選擇是實(shí)驗成敗的關(guān)鍵,如對魚(yú)體大小的選擇,捆綁?mèng)~(yú)體的夾板和線(xiàn)繩的選擇等。經(jīng)實(shí)踐證明魚(yú)體大小以6~10cm長(cháng)為宜,捆綁?mèng)~(yú)鰭用紗布較佳,捆綁鰭用輕且不易滑脫的材質(zhì)為宜,如用輕的木片、塑料片等。要鼓勵學(xué)生自行完成探究實(shí)驗,培養學(xué)生動(dòng)手能力。在實(shí)驗探究鰭對魚(yú)運動(dòng)的作用時(shí),應引導學(xué)生想辦法只對單一因素進(jìn)行觀(guān)察,而限制其他因素的干擾,即分別探討某一種鰭對魚(yú)的作用,并作好實(shí)驗記錄。)下面我們就來(lái)開(kāi)始我們的探究過(guò)程:

  一、提出問(wèn)題:魚(yú)在游泳時(shí),胸鰭、背鰭、尾鰭分別起什么作用

  二、作出假設:魚(yú)在游泳時(shí),胸鰭、背鰭起平衡魚(yú)體的.作用,其中胸鰭有轉換方向的作用,背鰭能防止魚(yú)體側翻;尾鰭產(chǎn)生前進(jìn)的動(dòng)力,決定運動(dòng)的方向。

  三、制定計劃:

  實(shí)驗材料及用具:四個(gè)玻璃缸、四條大小相同的鯽魚(yú)、輕的木片或塑料片、細繩子、紗布。

  實(shí)驗步驟:

  1、在四只大玻璃缸上分別標上A、B、C、D,然后注水,水的高度為缸高的三分之二左右。

  2、對三條鯽魚(yú)做如下處理:

  用木片和繩子縛住第一條鯽魚(yú)的胸鰭后放入A缸用木片和繩子縛住第二條鯽魚(yú)的背鰭后放入B缸用木片和繩子縛住第三條鯽魚(yú)的尾鰭后放入C缸第四條鯽魚(yú)做對照,不做任何處理直接放入D缸

  3、觀(guān)察四條鯽魚(yú)的運動(dòng)情況

  四、實(shí)施計劃

  現象:

  A缸中的鯽魚(yú)能夠向前運動(dòng),但左右搖擺不定,不能轉向,不能掌握平衡。

  B缸中的鯽魚(yú)能夠向前運動(dòng),但魚(yú)體側翻,不能維持魚(yú)體的直立狀態(tài)。

  C缸中的鯽魚(yú)能保持魚(yú)體平衡,但基本上沒(méi)有前進(jìn)。

  D缸中的鯽魚(yú)既能平衡身體,又能自由自在向前游動(dòng)。

  五、分析結果,得出結論

  魚(yú)游泳時(shí),主要靠身體軀干部和尾鰭的左右擺動(dòng)擊動(dòng)水流產(chǎn)生前進(jìn)的動(dòng)力,其他魚(yú)鰭起輔助作用。魚(yú)在運動(dòng)時(shí),胸鰭、腹鰭和背鰭都有維持魚(yú)體的平衡的作用,尾鰭可以產(chǎn)生前進(jìn)的動(dòng)力,同時(shí)還有決定魚(yú)運動(dòng)方向的作用。

  六、表達與交流

  臀鰭:協(xié)調其它各鰭,起平衡作用,若失去,身體輕微搖晃。

  腹鰭起到穩定流經(jīng)身體的水流的作用,也有平衡和穩定的作用。

  生物實(shí)驗報告12

  實(shí)驗名稱(chēng):

  觀(guān)察洋蔥表皮細胞。

  實(shí)驗目的:

  1、學(xué)習制作洋蔥表皮玻片標本。

  2、學(xué)會(huì )使用顯微鏡觀(guān)察洋蔥表皮,用圖畫(huà)記錄觀(guān)察到的洋蔥表皮細胞。

  3、對比用肉眼、放大鏡、顯微鏡看到的洋蔥表皮各有什么不同。

  實(shí)驗重點(diǎn):

  用顯微鏡觀(guān)察洋蔥表皮細胞。

  實(shí)驗難點(diǎn):

  正確使用顯微鏡。

  實(shí)驗準備:

  分組實(shí)驗器材:顯微鏡、洋蔥、小刀、清水、滴管、吸水紙、載玻片、蓋玻片、鑷子、放大鏡等。 實(shí)驗過(guò)程:

  一、導入課題

  出示洋蔥。問(wèn):如果從它的內表皮上揭下一塊,用顯微鏡來(lái)觀(guān)察能看到些什么呢?(板書(shū)課題)

  二、制作洋蔥表皮玻片標本

  1、師講解并演示制作洋蔥表皮玻片標本的方法與步驟。

 。1)在一個(gè)干凈的玻璃載片中間滴一滴清水;

 。2)用小刀在洋蔥鱗葉片內壁劃一個(gè)“井”字,用鑷子取下“井”中洋蔥內表皮放到載玻片的水滴中央,注意標本要平展開(kāi),不能折疊;

 。3)用蓋玻片傾斜著(zhù)蓋到標本上面,放蓋玻片時(shí),先放一端,再慢慢放下另一端,注意不要有氣泡。如水不足,可沿蓋玻片邊緣滴加;若水分過(guò)多,可用吸水紙吸掉;

 。4)從蓋玻片的一邊滴一滴稀釋的碘酒,并把玻片微微傾斜,再在蓋玻片的另一邊用吸水紙吸掉多余的水;

 。5)洋蔥表皮玻片標本做成可進(jìn)行觀(guān)察。

  2、學(xué)生以組為單位自制玻片標本(最好制三份裝片,便于下面的對比觀(guān)察),教師巡視指導(教育學(xué)生注意安全)。

  三、觀(guān)察洋蔥表皮細胞

  1、先用肉眼觀(guān)察洋蔥表皮將看到的內容畫(huà)在科學(xué)記錄本上。

  2、再用放大鏡觀(guān)察洋蔥表皮將看到的內容畫(huà)到科學(xué)記錄本上。

  3、學(xué)生交流用肉眼和放大鏡分別觀(guān)察到什么?它們有何不同?

  4、利用顯微鏡觀(guān)察洋蔥表皮細胞。

 。1)、出示顯微鏡,引導學(xué)生認識顯微鏡,簡(jiǎn)介各部分的名稱(chēng)、功能及使用方法,學(xué)生每5人一組操作熟悉顯微鏡。

 。2)、各組利用顯微鏡觀(guān)察洋蔥表皮細胞。(師操作演示:安放――對光――上片――調焦――觀(guān)察。生一步步跟著(zhù)操作。)

 。3)、學(xué)生觀(guān)察、記錄、描畫(huà)洋蔥表皮細胞。教師巡視指導,各組的實(shí)驗組長(cháng)監督組員操作是否規范,要求每個(gè)人都要操作、都要觀(guān)察,并將觀(guān)察結果進(jìn)行交流。組長(cháng)將大家在顯微鏡下的發(fā)現畫(huà)到科學(xué)記錄本上。

  5、全班交流在顯微鏡下的發(fā)現。

 。1)各組推薦發(fā)言代表談自己的.發(fā)現。

 。2)各組將所畫(huà)的觀(guān)察結果向全班展示。

 。3)交流討論評價(jià)。

  6、師小結:我們發(fā)現放大鏡比肉眼、顯微鏡比放大鏡看到的細節更多,更清楚。我們發(fā)現洋蔥表皮是由一個(gè)個(gè)比較規則的多邊形組成的,而且大多呈長(cháng)方形,外為細胞壁,內為無(wú)色細胞質(zhì)和細胞核。洋蔥表皮上的一個(gè)個(gè)小房間似的結構,就是洋蔥的細胞。(師一邊描述一邊畫(huà)洋蔥細胞簡(jiǎn)圖)

  四、實(shí)驗結束。

  回收實(shí)驗器材,整理實(shí)驗桌。

  生物實(shí)驗報告13

  一觀(guān)察洋蔥表皮細胞

  實(shí)驗目的:通過(guò)觀(guān)察洋蔥表皮細胞,說(shuō)明植物體是由細胞組成的實(shí)驗材料::顯微鏡、洋蔥、鑷子、滴管、水、載玻片、針、蓋玻片、吸水紙、紗布。實(shí)驗步驟:

 。ㄒ)制做臨時(shí)裝片。

 。1)用紗布將載玻片、蓋玻片擦干凈。

 。2)用液管在載玻片上滴一滴清水。

 。3)用鑷子在洋蔥鱗片葉上撕下一小片表皮。

 。4)將撕下的表皮放入載玻片上的水滴中,用針將其展開(kāi)。

 。5)用鑷子夾住蓋玻片,先將一邊接觸載玻片的水滴邊經(jīng)再慢慢把蓋玻片放平,制成臨時(shí)切片。

 。4)在蓋玻片的翼側滴加稀碘液,用吸水紙從蓋玻片的另一側吸引,使染液浸潤標本的全部。

 。ǘ┌惭b臨時(shí)裝片:將臨時(shí)切片放到顯微鏡上,調整顯微鏡與臨時(shí)切片位置,直到可以觀(guān)察到清晰的圖像為止實(shí)驗圖像:

  200倍800倍

  實(shí)驗結論:洋蔥表皮是由無(wú)數細胞構成的,有明顯的細胞核,細胞壁,細胞質(zhì)出現。

  二.觀(guān)察人的口腔上皮細胞的實(shí)驗教案

  1、學(xué)習要求:

  1.制作和觀(guān)察人的口腔上皮細胞臨時(shí)裝片。2.認識人的口腔上皮細胞的基本結構。

  2、材料用具:

  生理鹽水,稀碘液,消毒牙簽,滴管,紗布,鑷子,吸水紙,載玻片,蓋玻片,顯微鏡。

  3、實(shí)驗方法和步驟:

  1.用潔凈的紗布將載玻片和蓋玻片擦拭干。2.在載玻片中央滴一滴生理鹽水。

  3.用消毒牙簽在口腔內側壁輕刮幾下放在生理鹽水中。

  4.用鑷子夾起蓋玻片,使它的一邊先接觸載玻片上的水滴,再將蓋玻片緩緩放平蓋在水滴。

  5.在蓋玻片的一側滴加幾滴稀碘液,用吸水紙在蓋玻片的另一側吸引,使碘液浸潤標本的`全部。

  總結步驟:

  擦-→滴-→取-→蓋-→染-→吸五、繪制人的口腔上皮細胞

  三.測定某種食物中的能量

  實(shí)驗目標一顆花生種子含有多少能量?

  實(shí)驗器材或藥品 水

  實(shí)驗探究過(guò)程 現象

  分析及結論

  1、在錐形瓶中裝30ml水

  實(shí)驗前水溫:

  2、把花生固定在解剖20℃、20℃、24℃

  針上

  試驗后水溫:

  3、在酒精燈上點(diǎn)燃花73℃、78℃、68℃

  4.2J生并盡快把花生放到錐

  溫差:×51×4.2=6300J

  形瓶下面 53℃、58℃、44℃ 、待花生完全燒完后,平均值:51.666℃

  一顆花生種子約含有6300J

  實(shí)驗結的能量論

  四.探究饅頭在口腔中的變化實(shí)驗報告

  一、問(wèn)題的提出:取一塊饅頭放到口中咀嚼?谇恢械酿z頭要經(jīng)過(guò)牙齒的咀嚼、舌的攪拌以及與唾液的混合。細細品嘗這時(shí)的饅頭,你能?chē)L出一些甜味來(lái)。饅頭變甜是否與牙齒的咀嚼、舌的攪拌以及唾液的分泌有關(guān)呢?如果有關(guān),它們各起什么作用呢?饅頭變甜是否是淀粉發(fā)生了變化?

  二、作出假設饅頭變甜與牙齒的咀嚼、舌的攪拌以及唾液的分泌都有關(guān)。饅頭變甜是因為淀粉被唾液中的唾液淀粉酶分解成了帶有甜味的麥芽糖。在這個(gè)過(guò)程中,通過(guò)牙齒的咀嚼將饅頭嚼碎,舌的攪拌使饅頭碎屑與唾液充分混合。

  三、制定計劃(一)實(shí)驗原理

  饅頭變甜應該是成分中糖類(lèi)發(fā)生變化。饅頭的主要成分是淀粉,因此本實(shí)驗利用淀粉遇碘變藍的特性,以及口腔中的溫度為37℃的常識?刂谱兞客僖,以及模擬牙齒的咀嚼作用和舌的攪拌作用。三支試管,兩個(gè)對照實(shí)驗。一支試管作為實(shí)驗組,另兩支試管作為對照組。如果模擬牙齒的咀嚼功能、舌的攪拌功能并加入唾液,滴入碘液后,實(shí)驗組的試管內沒(méi)有變成藍色,說(shuō)明饅頭中淀粉的變化與牙齒的咀嚼、舌的攪拌以及唾液的分泌都有關(guān)。如果變成藍色,則說(shuō)明淀粉沒(méi)有被分解,饅頭變甜與牙齒的咀嚼、舌的攪拌以及唾液的分泌沒(méi)有關(guān)系。(二)實(shí)驗變量的控制

  兩個(gè)對照實(shí)驗。一個(gè)對照實(shí)驗的實(shí)驗變量是唾液,實(shí)驗組內加入唾液2ml,對照組試管加入2ml清水。另一個(gè)對照實(shí)驗的實(shí)驗變量是饅頭塊的狀態(tài):實(shí)驗組的饅頭塊用刀切碎,放入試管中并震蕩試管,對照組的饅頭塊不做任何處理,直接整塊放入試管中,并且不震蕩試管。

 。ㄈ⿲(shí)驗方案實(shí)驗材料用具:饅頭塊(三小塊等大)試管(三支)燒杯(三個(gè))盛唾液的小燒杯滴管溫度計石棉網(wǎng)三腳架碘液小刀小木板

  1.取新鮮的饅頭,切成大小相同的A、B、C三小塊。將A塊和B塊分別用刀細細地切碎,拌勻(模擬牙齒的咀嚼和舌的攪拌),C塊不做任何處理。

  2.用涼開(kāi)水將口漱凈,口內含一塊消毒棉絮。約1分鐘之后,用

  干凈的鑷子取出棉絮,將棉絮中的唾液擠壓到小燒杯中。

  3.取3支潔凈的試管,分別編上(1)、(2)、(3)號,然后做如下處理:

  將A饅頭碎屑放入(1)號試管中,注入2ml唾液并震蕩試管;將B饅頭碎屑放入(2)號試管,注入2ml清水并震蕩試管;將C饅頭放入(3)號試管,不震蕩。將三支試管一起放入37℃左右的溫水中。4.5-10分鐘后,取出這三支試管,各滴加2滴碘液,搖勻。然后,觀(guān)察并記錄各試管中的顏色變化。四:實(shí)施計劃

  按確定的探究計劃進(jìn)行實(shí)驗,觀(guān)察實(shí)驗現象?梢(jiàn),(1)號試管中沒(méi)有變成藍色;(2)號試管變成藍色;(3)號試管中的饅頭塊部分變成藍色。

  五、分析實(shí)驗結果,得出結論

  分析實(shí)驗現象,(1)號試管中滴入碘液后,沒(méi)有變成藍色,說(shuō)明試管中已經(jīng)沒(méi)有淀粉,淀粉被唾液中的唾液淀粉酶分解成麥芽糖了,麥芽糖沒(méi)有遇碘變藍的特性,所以滴入碘液后不變藍。(2)號試管中加入的是清水和饅頭碎屑,水沒(méi)有消化淀粉的作用,因此,滴入碘液后,饅頭碎屑中淀粉遇碘變成藍色。(3)號試管中只有部分變成藍色,說(shuō)明饅頭與唾液的接觸不充分,只有部分淀粉被分解。由此,得出結論:說(shuō)明饅頭變甜與牙齒的咀嚼、舌的攪拌以及唾液的分泌都有關(guān)系。因為上述活動(dòng)模擬了消化與唾液的分泌以及牙齒的咀嚼、舌的攪拌,(1)號試管中的饅頭接觸到了足量的唾液,并被消化。

  生物實(shí)驗報告14

  一、 實(shí)驗室規則

  1.實(shí)驗前應認真預習實(shí)驗指導,明確實(shí)驗目的和要求,寫(xiě)出預實(shí)驗報告。

  2.進(jìn)入實(shí)驗室必須穿白大衣。嚴格遵守實(shí)驗課紀律,不得無(wú)故遲到或早退。不得高聲說(shuō)話(huà)。嚴禁拿實(shí)驗器具開(kāi)玩笑。實(shí)驗室內禁止吸煙、用餐。

  3.嚴格按操作規程進(jìn)行實(shí)驗。實(shí)驗過(guò)程中自己不能解決或決定的問(wèn)題,切勿盲目處理,應及時(shí)請教指導老師。

  4.嚴格按操作規程使用儀器,凡不熟悉操作方法的儀器不得隨意動(dòng)用,對貴重的精密儀器必須先熟知使用方法,才能開(kāi)始使用;儀器發(fā)生故障,應立即關(guān)閉電源并報告老師,不得擅自拆修。

  5.取用試劑時(shí)必須“隨開(kāi)隨蓋”,“蓋隨瓶走”,即用畢立即蓋好放回原處,切忌“張冠李戴”,避免污染。

  6.愛(ài)護公物,節約水、電、試劑,遵守損壞儀器報告、登記、賠償制度。

  7.注意水、電、試劑的使用安全。使用易燃易爆物品時(shí)應遠離火源。用試管加熱時(shí),管口不準對人。嚴防強酸強堿及有毒物質(zhì)吸入口內或濺到別人身上。任何時(shí)候不得將強酸、強堿、高溫、有毒物質(zhì)拋灑在實(shí)驗臺上。

  8.廢紙及其它固體廢物嚴禁倒入水槽,應倒到垃圾桶內。廢棄液體如為強酸強堿,必須事先用水稀釋?zhuān)娇傻谷胨蹆,并放水沖走。

  9.以實(shí)事求是的科學(xué)態(tài)度如實(shí)記錄實(shí)驗結果,仔細分析,做出客觀(guān)結論。

  實(shí)驗失敗,須認真查找原因,而不能任意涂改實(shí)驗結果。實(shí)驗完畢,認真書(shū)寫(xiě)實(shí)驗報告,按時(shí)上交。

  10.實(shí)驗完畢,個(gè)人應將試劑、儀器器材擺放整齊,用過(guò)的玻璃器皿應刷洗干凈歸置好,方可離開(kāi)實(shí)驗室。值日生則要認真負責整個(gè)實(shí)驗室的清潔和整理,保持實(shí)驗整潔衛生。離開(kāi)實(shí)驗室前檢查電源、水源和門(mén)窗的安全等,并嚴格執行值日生登記制度。

  二、實(shí)驗報告的基本要求

  實(shí)驗報告通過(guò)分析總結實(shí)驗的結果和問(wèn)題,加深對有關(guān)理論和技術(shù)的理解與掌握,提高分析、綜合、概括問(wèn)題的能力,同時(shí)也是學(xué)習撰寫(xiě)研究論文的過(guò)程。

  1.實(shí)驗報告應該在專(zhuān)用的生化實(shí)驗報告本上、按上述格式要求書(shū)寫(xiě)。

  2.實(shí)驗報告的前三部分①實(shí)驗原理、②實(shí)驗材料(包括實(shí)驗樣品、主要試劑、主要儀器與器材)、③實(shí)驗步驟(包括實(shí)驗流程與操作步驟)要求在實(shí)驗課前預習后撰寫(xiě),作為實(shí)驗預習報告的內容。預習時(shí)也要考慮并設計好相應實(shí)驗記錄的表格。

  3.每項內容的基本要求

 。1)實(shí)驗原理:簡(jiǎn)明扼要地寫(xiě)出實(shí)驗的原理,涉及化學(xué)反應時(shí)用化學(xué)反應方程式表示。

 。2)實(shí)驗材料:應包括各種來(lái)源的生物樣品及試劑和主要儀器。說(shuō)明化學(xué)試劑時(shí)要避免使用未被普遍接受的商品名和俗名。試劑要標清所用的濃度。

 。3)實(shí)驗步驟:描述要簡(jiǎn)潔,不能照抄實(shí)驗講義,可以采用工藝流程圖的方式或自行設計的表格來(lái)表示,但對實(shí)驗條件和操作的關(guān)鍵環(huán)節應寫(xiě)清楚,以便他人重復。

 。4)實(shí)驗記錄:包括主要實(shí)驗條件、實(shí)驗中觀(guān)察到的現象及實(shí)驗中的原始數據。

 。5)結果(定量實(shí)驗包括計算):應把所得的實(shí)驗結果(如觀(guān)察現象)和數據進(jìn)行整理、歸納、分析、對比,盡量用圖表的形式概括實(shí)驗的結果,如實(shí)驗組與對照組實(shí)驗結果的.比較表等(有時(shí)對實(shí)驗結果還可附以必要的說(shuō)明)。

 。6)討論:不應是實(shí)驗結果的重述,而是以結果為基礎的邏輯推論。如對定性實(shí)驗,在分析實(shí)驗結果的基礎上應有中肯的結論。還可以包括關(guān)于實(shí)驗方法、操作技術(shù)和有關(guān)實(shí)驗的一些問(wèn)題,對實(shí)驗異常結果的分析和評論,對于實(shí)驗設計的認識、體會(huì )和建議,對實(shí)驗課的改進(jìn)意見(jiàn)等。

 。7)結論:一般實(shí)驗要有結論,結論要簡(jiǎn)單扼要,說(shuō)明本次實(shí)驗所獲得的結果。

  三、實(shí)驗報告的評分標準(百分制)

  1.實(shí)驗預習報告內容(30分)

  學(xué)生進(jìn)入實(shí)驗室前應預習實(shí)驗,并書(shū)寫(xiě)預習報告。實(shí)驗預習報告應包括以下三部分: ①實(shí)驗原理(10分):要求以自己的語(yǔ)言歸納要點(diǎn);②實(shí)驗材料(5分):包括樣品、試劑及儀器。只列出主要儀器、試劑(常規材料不列);③實(shí)驗方法(15分):包括流程或路線(xiàn)、操作步驟,要以流程圖、表格式給出要點(diǎn),簡(jiǎn)明扼要。依據各部分內容是否完整、清楚、簡(jiǎn)明等,分以下三個(gè)等級給分。

  優(yōu)秀:項目完整,能反映實(shí)驗者的加工、整理、提煉。

  合格:較完整,有一定整理,但不夠精煉。

  不合格:不完整、缺項,大段文字,完全照抄教材,記流水賬。

  實(shí)驗預習報告不合格者,不允許進(jìn)行實(shí)驗。該實(shí)驗應重新預約,待實(shí)驗室安排時(shí)間后方可進(jìn)行實(shí)驗。

  2.實(shí)驗記錄內容(20分)

  實(shí)驗記錄是實(shí)驗教學(xué)、科學(xué)研究的重要環(huán)節之一,必須培養嚴謹的科學(xué)作風(fēng)。

  實(shí)驗記錄的主要內容包括以下三方面:①主要實(shí)驗條件(如材料的來(lái)源、質(zhì)量;試劑的規格、用量、濃度;實(shí)驗時(shí)間、操作要點(diǎn)中的技巧、失誤等,以便總結實(shí)驗時(shí)進(jìn)行核對和作為查找成敗原因的參考依據);②實(shí)驗中觀(guān)察到的現象(如加入試劑后溶液顏色的變化);③原始實(shí)驗數據:設計實(shí)驗數據表格(注意三線(xiàn)表格式),準確記錄實(shí)驗中測得的原始數據。記錄測量值時(shí),要根據儀器的精確度準確記錄有效數字(如吸光值為0.050,不應寫(xiě)成0.05),注意有效數字的位數。

  實(shí)驗記錄應在實(shí)驗過(guò)程中書(shū)寫(xiě);應該用鋼筆或者圓珠筆記錄,不能用鉛筆。記錄不可擦抹和涂改,寫(xiě)錯時(shí)可以準確劃去重記。記錄數據時(shí)請教師審核并簽名。

  實(shí)驗記錄分以下三個(gè)等級給分。

  優(yōu)秀:如實(shí)詳細地記錄了實(shí)驗條件、實(shí)驗中觀(guān)察到的現象、結果及實(shí)驗中的原始數據(如三次測定的吸光度值)等;實(shí)驗記錄用鋼筆或者圓珠筆記錄,沒(méi)有抹擦和涂改跡象。書(shū)寫(xiě)準確,表格規范(三線(xiàn)表)。有教師的簽字審核。

  合格:記錄了主要實(shí)驗條件,但不詳細、凌亂;實(shí)驗中觀(guān)察到的現象不細致;原始數據無(wú)涂改跡象,但不規范。有教師的簽字審核。

  不合格:記錄不完整,有遺漏;原始數據有抹擦和涂改跡象、捏造數據(以0分計);圖、表格形式錯誤;用鉛筆記錄原始數據;無(wú)教師的簽字審核。 若記錄的結果有懷疑、遺漏、丟失,必須重做實(shí)驗,培養嚴謹的科學(xué)作風(fēng)。

  3.結果與討論(45分)

 。1)數據處理(5分)

  對實(shí)驗中所測得的一系列數值,要選擇合適的處理方法進(jìn)行整理和分析。數據處理時(shí),要根據計算公式正確書(shū)寫(xiě)中間計算過(guò)程或推導過(guò)程及結果,得出最終實(shí)驗結果。要注意有效數字的位數、單位(國際單位制)。經(jīng)過(guò)統計處理的數據要以X〒SD表示?煞殖梢韵氯齻(gè)等級給分。

  優(yōu)秀:處理方法合理,中間過(guò)程清楚,數據格式單位規范。

  合格:處理方法較合理,有中間計算過(guò)程;數據格式單位較規范。

  不合格:處理方法不當;無(wú)中間過(guò)程;有效數字的位數、單位不規范。

 。2)結果(20分)

  實(shí)驗結果部分應把所觀(guān)察到的現象和處理的最終數據進(jìn)行歸納、分析、比對,以列表法或作圖法來(lái)表示。同時(shí)對結果還可附以必要的說(shuō)明。

  要注意圖表的規范:表格要有編號、標題;表格中數據要有單位(通常列在每一列頂端的第一行或每一行左端的第一列)。圖也要有編號、標題,標注在圖的下方;直角坐標圖的縱軸和橫軸要標出方向、名稱(chēng)、單位和長(cháng)度單位;電泳圖譜和層析圖譜等要標明正、負極方向及分離出的區帶、色帶或色斑的組分或成分。電泳結果還要標記泳道,并在圖題下給出泳道的注釋?zhuān)灰獦顺龇肿恿繕藴实母鳁l帶的大小。并且注意需要結合圖表對結果進(jìn)行較詳細的解釋說(shuō)明。

  可分成以下三個(gè)等級給分。

  優(yōu)秀:實(shí)驗結果有歸納、 解釋說(shuō)明,結果準確,格式規范。

  合格:堆砌實(shí)驗現象、數據,解釋說(shuō)明少。

  不合格:最終實(shí)驗結果錯誤且無(wú)解釋說(shuō)明,圖表、數字不規范。

 。3)討論(20分)

  討論應圍繞實(shí)驗結果進(jìn)行,不是實(shí)驗結果的重述,而是以實(shí)驗結果為基礎的邏輯推論,基本內容包括:①用已有的專(zhuān)業(yè)知識理論對實(shí)驗結果進(jìn)行討論,從理論上對實(shí)驗結果的各種資料、數據、現象等進(jìn)行綜合分析、解釋?zhuān)f(shuō)明實(shí)驗結果,重點(diǎn)闡述實(shí)驗中出現的一般規律與特殊性規律之間的關(guān)系。

  生物實(shí)驗報告15

  一、實(shí)驗目的:

  1、掌握顯示細胞中過(guò)氧化物酶反應的原理和方法。2.了解細胞凋亡的生物學(xué)意義

  3、掌握凋亡細胞的形態(tài)學(xué)檢測方法

  二、實(shí)驗原理:

  1、細胞內的過(guò)氧化物酶能把許多胺類(lèi)氧化為有色化合物,用聯(lián)苯胺處理標本,細胞內的過(guò)氧化物酶能把聯(lián)苯胺氧化為藍色的聯(lián)苯胺藍,進(jìn)而變?yōu)樽厣a(chǎn)物,因而可以根據顏色反應來(lái)判定過(guò)氧化物酶的`有無(wú)或多少。中間產(chǎn)物藍色聯(lián)苯胺是不穩定的,無(wú)需酶的參加即可氧化為棕色化合物。

  2、細胞凋亡是指細胞在生理或病理條件下,遵循自身的程序,自己結束其生命的過(guò)程。它是一個(gè)主動(dòng)的、高度有序的,基因控制的,一系列酶參與的過(guò)程。

  3、凋亡細胞形態(tài)學(xué)特征是:體積變小,細胞質(zhì)濃縮;細胞核發(fā)生染色質(zhì)凝聚和聚集于核膜周?chē)?邊緣化);細胞膜有小泡狀形成;晚期細胞膜內陷形成大小不同的凋亡小體;根據細胞凋亡形態(tài)學(xué)特征進(jìn)行顯微觀(guān)察是檢測細胞凋亡的一種直觀(guān)、可靠的方法。

  三、實(shí)驗步驟:

  細胞中過(guò)氧化物酶的顯示

  1、在載片上滴一滴PBS緩沖液;

  2、取骨髓細胞:用斷頸法處死小鼠,立即剪取后肢,去除肌肉,剝出后肢股骨,剪開(kāi)股骨一端,用牙簽尖的一端插入剪開(kāi)的小孔中,摳取少許骨髓細胞置滴有PBS的載片上;

  3、涂片:用另一玻片將骨髓細胞沿一個(gè)方向涂布推開(kāi),室溫晾干;

  4、媒染:在涂片上滴0.5%硫酸銅液,以蓋滿(mǎn)涂片為宜,處理30秒-1分鐘。5、傾去硫酸銅液,直接滴入聯(lián)苯胺混合液反應6分鐘(以蓋滿(mǎn)涂片為宜)6、清水沖洗,番紅復染2min。

  7、鏡檢:清水沖洗,室溫晾干,先低倍鏡下觀(guān)察,后換高倍鏡下觀(guān)察(油鏡100×)

  細胞凋亡的形態(tài)學(xué)檢測與觀(guān)察吉姆薩染色:

  1、取細胞爬片置于小培養皿中(有細胞面朝上)2、生理鹽水輕輕漂洗細胞3、95%乙醇固定5min

  4、PBS緩沖液洗2次

  5、吉姆薩染色液染色5min6、蒸餾水輕輕洗去染液

  7、普通光學(xué)顯微鏡下觀(guān)察。吖啶橙染色:

  1、取細胞爬片置于小培養皿中(有細胞面朝上)2、生理鹽水輕輕漂洗細胞

  3、甲醇:冰醋酸(3:1)固定5min4、PBS緩沖液洗2次每次1min

  5、0.01%吖啶橙染色液在避光環(huán)境下染色5min6、蒸餾水輕輕洗去染液

  6、選用藍光激發(fā)濾片在熒光顯微鏡下觀(guān)察。

  四、結果與分析:

  1、根據隨機選擇的幾個(gè)視野的統計,該樣品的細胞凋亡率=227/506×100=44.9

  Hela細胞凋亡過(guò)程中核染色質(zhì)的形態(tài)變化(吖啶橙染色)

  五、思考題:

  1、細胞凋亡的調控機制

  細胞凋亡是一個(gè)受基因調控、眾多細胞膜受體和胞漿蛋白參與的細胞主動(dòng)自殺過(guò)程,其觸發(fā)因素多種多樣,包括細胞內誘導因子和抑制因子對細胞凋亡的調控。

  2、細胞凋亡的特征

  凋亡細胞形態(tài)學(xué)特征是:體積變小,細胞質(zhì)濃縮;細胞核發(fā)生染色質(zhì)凝聚和聚集于核膜周?chē)?邊緣化);細胞膜有小泡狀形成;晚期細胞膜內陷形成大小不同的凋亡小體。

  3、研究細胞凋亡的方法

  定性的研究方法:常規瓊脂糖凝膠電泳、脈沖場(chǎng)倒轉瓊脂糖凝膠電泳、形態(tài)學(xué)觀(guān)察(普通光學(xué)顯微鏡、透射電鏡、熒光顯微鏡)

  定量或半定量的研究方法:各種流式細胞儀方法、原位末端標記法、ELISA定量瓊脂糖凝膠電泳。

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